白细胞介素17A基因rs3748067位点单核苷酸多态性在广西人群中的分布特点(2)
1对象与方法1.1研究对象研究对象共443 例,其中男性278 例,女性165 例,年龄25~84岁,均为右江民族医学院附属医院体检中心健康体检者,通过各项血液和影像学检查,未发现肿瘤以及肝脏、肾脏、心脑血管和神经系统疾病,排除遗传病家族史。所有研究对象均为相互间无血缘关系的广西地区人群。
1.2研究方法
1.2.1基因组DNA提取用EDTA-K2抗凝的采血管采集体检者静脉血3 ml,放于-50℃冰箱保存备用。基因组DNA提取采用试剂盒离心柱法(TIANamp Blood DNA Kit),提取后存放在-50℃冰箱保存备用。
1.2.2引物设计与合成 在NCBI上查找并选取包含rs3748067位点的适宜长度DNA片段,输入网页Primer 3.0软件设计引物,得出序列交予上海天昊生物科技有限公司合成。rs3748067上游引物序列为:CACTCCTAGGGCCTGGCTTCTG,下游引物序列为:GGATGGAGCAGGATGGAGTGAA,延伸引物序列为:TTTTTTTTTTTTTTTTTTTGGGCTGAACTTTTCTCATACTTAAA ......
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