Foxm1、Gli2在乳腺癌中的表达及临床意义(2)
1.2 实验试剂兔抗人Foxm1多克隆抗体(美国ABGENT公司),Gli2多克隆抗体(英国Abcam公司),抗体工作液和DAB显色试剂盒(北京中杉金桥生物技术公司)。
1.3 免疫组化法检测
将上述标本石蜡切片脱蜡、梯度酒精脱水,室温下置于3%过氧化氢溶液终孵育5~10 min,PBS冲洗3次,每次5 min。血清封闭,滴加抗Foxm1、Gli2一抗(Gli2按1∶200,Foxm1按1∶300稀释),4℃孵育过夜。PBS冲洗3次,每次5 min,滴加对应二抗工作液,37℃孵育30 min。PBS冲洗3次,每次5 min,滴加生物素标记的二抗,滴加少量DAB显色液反应3 min,复染、脱水、镜检。以PBS液代替一抗作为阴性对照。
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1.4 结果判定
Foxm1蛋白定位于细胞浆和细胞核 ......
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