1 资料与方法

    1.1 材料

    菌株是26695标准菌株，由本实验所保存，马血清、革兰染色试剂盒、CO2产气袋、脑心浸液培养基、提取RNA试剂盒、逆转录试剂盒、荧光定量试剂盒均购自卓一生物技术有限公司。实验用的仪器有：高速冷冻离心机、涡旋振荡器、普通PCR扩增仪、电子天平、恒温培养箱、恒温水浴箱、电子显微镜、超净工作台、超纯水机、超低温冰箱。

    1.2 方法

    1.2.1 幽门螺杆菌液体培养基(脑心浸液培养基)配制

    脑心浸液培养基按照说明配制，高压灭菌冷却后，每100 ml的培养基中加入5～10 ml的马血清，放入4℃冰箱备用。

    1.2.2 用倍比稀释法配制含有不同浓度甲硝唑的幽门螺杆菌培养基

    称取适量的甲硝唑，用配制好的脑心浸液培养基溶解成甲硝唑浓度为32 μg/ml的培养液，然后对此溶液进行2倍的倍比稀释：用灭菌1 ml吸管吸取上述配制好的32 μg/ml抗生素溶液5 ml，沿管壁徐徐注入含有5 ml脑心浸液培养基试管中，轻摇混匀，记为16 μg/ml稀释度含抗生素培养液。另取灭菌1 ml吸管，按照上述操作方法，进行2倍递增稀释。如此每递增稀释一次，即换用1支1 ml灭菌吸管，依次稀释至2 μg/ml稀释度含抗生素培养液，最终配制成0 μg/ml、2 μg/ml、4 μg/ml、8 μg/ml、16 μg/ml、32 μg/ml ......