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编号:13273500
POLD3在肝细胞癌中的表达及临床病理意义分析(2)
http://www.100md.com 2018年10月1日 《右江医学》 2018年第5期
     1.2细胞系及细胞培养HCC细胞SMCC-7721和非HCC肝细胞QSG-7701均购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库,所有细胞均在含有5%胎牛血清的DMEM培养基中培养,培养环境为5% CO2气体和37 ℃的恒温环境。

    1.3临床标本收集根据前述研究对象的入选与排除标准,收集在右江民族医学院附属医院住院符合要求的134例肝癌患者,按Edmondson-Steiner分级法(原发性肝癌诊疗规范,2017年版)进行分级:Ⅰ~Ⅱ级为高分化肝细胞性肝癌,98例;Ⅲ~Ⅳ级为中低分化肝细胞性肝癌,36例。

    1.4POLD3蛋白表达水平的检测分别使用免疫组织化学法及蛋白印迹法检测组织样本与细胞样本中的POLD3蛋白表达水平,POLD3抗体购自Santa Cruz生物科技公司,所有实验均设立阳性与阴性对照,按照标准操作流程完成,结果经高年资病理医师确认。POLD3蛋白的阳性定位于细胞核或细胞浆,以有明显的棕色颗粒作为阳性的判定标准,具体的判定方法见参考文献[12]。

    1.5POLD3 mRNA表达水平的检测按照已报道的实时荧光定量PCR技术检测新鲜组织样本和体外培养的细胞样本中的POLD3 mRNA表达水平[3] ......
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