1.3.5 線粒体膜电位检测

    取对数生长期的细胞以1×105个/mL的密度接种于6 孔培养板中，贴壁过夜，经药物孵育48 h后用 0.25%无EDTA的胰酶消化收集所有细胞，每样本细胞数大于 1×105个/mL，用预冷的PBS洗1次：①将JC-1染料溶于二甲基亚砜(DMSO)中，制备成浓度为1 μg/μL的JC-1工作液。②将100 μL细胞悬液(105个/mL)加入5 mL的流式测定管中，同时设阴性对照管。③在测定管中加入1 μL JC-1工作液，阴性对照管不加，轻轻混匀。④将测定管和阴性对照管置于培养箱中孵育15～20 min。⑤吸取500 μL PBS缓冲液分别加入测定管和对照管中，1000 rpm/mim，离心5 min，弃上清，重悬细胞。用流式细胞仪检测。流式细胞仪激发波为488 nm，红色荧光的最大发射波长为580/590 nm，绿色荧光的最大发射波长为510/527 nm，以红/绿荧光强度比值代表细胞线粒体膜电位的强度。

    1.3.6 ELISA法检测Caspase-3、Caspase-9的活性

    取对数生长期的细胞以1×105个/mL的密度接种于 6 孔培养板中 ......