黄达 刘燕 黄兰松 岑团 刘文静 潘兴寿 黄照河

    【摘要】 目的 ?建立小鼠心肌細胞缺氧/复氧模型，观察α-1抗胰蛋白酶(α-1 antitrypsin，A1AT)对小鼠心肌细胞凋亡的影响。

    方法 ?体外采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)4 mmol/L诱导的缺氧培养基培养小鼠心肌细胞，模拟缺氧/复氧模型，并筛选A1AT最佳干预浓度，筛选A1AT最佳干预浓度实验分为7个组：Blank组、Control组、H/R组、A1AT 10 μmol/L 组、A1AT 20 μmol/L 组、A1AT 40 μmol/L 组以及A1AT 80 μmol/L 组。筛选最佳干预时间实验分为8个组：Blank组、Control组、H/R组、A1AT 1 h组、A1AT 2 h组、A1AT 4 h组、A1AT 6 h组及A1AT 12 h组。之后A1AT干预实验分组：正常组(Control组)、缺氧/复氧组(H/R组)、α-1抗胰蛋白酶干预组(A1AT组)。利用CCK-8检测细胞功能、流式细胞仪检测细胞凋亡、免疫荧光及Western Blot 检测caspase-3的表达。并用SPSS 22.0进行数据统计。

    结果 ?A1AT最佳干预浓度为20 μmol/L，最佳干预时间为4小时。流式细胞仪检测发现H/R组细胞凋亡率增加，A1AT组细胞凋亡率明显下降，Control组、H/R组及A1AT组三组比较差异有统计学意义( P <0.05)。免疫荧光检测发现H/R组caspase-3分子表达强阳性，与Control组及A1AT组比较，差异有统计学意义( P <0.05)。Western Blot检测发现H/R组caspase-3蛋白表达上调，与Control组及A1AT组比较，差异有统计学意义( P <0.05)。

    结论 ?α-1抗胰蛋白酶对小鼠缺氧/复氧心肌细胞凋亡具有改善作用 ......