黄国日,潘革,莫锦丽,杨兰,黄忠向

    (1.广西医科大学第二附属医院儿科，广西南宁 530007；2.广西医科大学第三附属医院a.儿科，b.检验科，c.病理科,广西南宁 530031)

    急性肺损伤(acute lung injury，ALI)以呼吸困难为主要表现，患者可在各个年龄段发病，是目前临床危重医学研究重点[1]。ALI的病理改变在于过度炎症反应使肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞遭受广泛性破坏，如肺泡表面活性物质(SP-A、SP-D、AQP5等)合成减少，因此改善肺泡表面活性物质水平逐渐成为ALI患者治疗靶点[2]。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)为一类非造血细胞的多能干细胞，具有向多种组织细胞分化的能力[3]。近年来随着对干细胞多向分化潜能研究深入，发现干细胞可再生修复ALI的肺泡上皮细胞和内皮细胞，重建损伤的肺组织结构及功能，成为ALI治疗新靶点，并可能是未来治疗ALI患者的关键所在[4]。本实验通过对幼鼠自体骨髓干细胞进行动员，扩增入血，分析动员后肺泡表面活性蛋白水平变化，进而找到治疗ALI的新途径，为下一步临床开展儿童ALI的救治提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物选取无特定病原体(specific pathogen free，SPF)级BALB/c品系健康幼鼠120只，体重174～230 g，平均(201.32±20.56) g，由广州四和生物科技有限公司提供，实验动物生产许可证号：44007200101674，使用许可证号：SCXK(粤)2016-0041，采用随机数字表将实验动物随机分为对照组和动员组，每组60只。 对照组雄性20只，雌性40只，平均体重(201.18±21.21) g；动员组雄性27只，雌性33只，平均体重 (202.76±22.05) g。两组性别、体重比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。实验开展前，幼鼠均饲养1周(饲养温度设置为21 ℃)，自由进食和饮水。饲养观察1周无异常后进行实验，实验期间无幼鼠死亡。本实验获得广西医科大学动物实验中心伦理委员会批准。

    1.2 实验主要仪器及试剂苏州安泰洁净工作台(SW-CJ-IFD)，低速离心机(中佳，SC3614)，倒置光学显微镜(OLYMPUS CKX41, U-CTR30-2),倒置荧光显微镜(生产商：Leica，型号：DMI6000B)、台式高速冷冻离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司，TGL-16)、分光光度计(厂家：上海五久自动化设备有限公司 ......