廖文彦,廖炼炼▲,莫巧明,艾文杰,邹文静,梁英业,兰蕾,秦祖杰,蒙晓明,张锦超,梁欣,唐林涛,田永强

    (1.广西中医药大学附属国际壮医医院,广西南宁 530201;2.广西中医药大学第一附属医院,广西南宁 530023;3.广西中医药大学研究生学院,广西南宁 530001)

    疼痛的发生十分广泛,被称为第五大生命体征,是一种在人体受到内外因素损害时极易引发的不适感。国际疼痛研究协会(IASP)对神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)的最新定义为：由躯体感觉神经系统的损伤和疾病直接造成的疼痛[1]。NPP是一种常见的慢性疼痛类型[2],可由多种因素诱导发生,在中国[3]、美国[4]、欧洲[5]均有较高的发病率,不仅给患者躯体和心理两方面造成痛苦,产生了昂贵的医疗费用,还给患者造成工作效率低下等消极影响,带来了相当的经济损失[6]。现代医学常用的药物疗法仅能对NPP患者的部分症状具有一些缓解作用,且长期使用此类药物可带来不同程度的不良反应[7]。寻求治疗NPP的有效方法,解除患者身心痛苦,减轻社会医疗成本和经济负担的需求极为迫切,也是当今医学界研究的热点。传统医学疗法在疼痛的治疗上有其独特的优势,特别是外治疗法受到了众多学者的关注和研究[8-10],其中壮医针刺疗法对于疼痛治疗的有效性和安全性在临床上得到了广泛认可[11]。但对于壮医针刺疗法治疗疼痛的相关作用机制研究目前仍属空白。IKKβ是神经病理性疼痛病理生理机制中重要的关键因子[12],该因子与NPP的发生发展关系密切,其表达升高可引起下游炎症因子在体内含量增加,从而引起炎症反应刺激组织神经末梢造成疼痛。有研究发现miR-429对IKKβ的表达具有下调作用[13]。本研究从上述机制切入,以动物实验方法探索验证壮医针刺疗法治疗疼痛的分子生物学机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物实验选取50只雄性成年SD大鼠(湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供),体重均为250～300 g,生产许可证编号：SCXK(湘)2019-0004,使用许可证编号：SYXK(桂)2019-0001。动物进行7天适应性喂养后开始实验。实验全过程严格按照广西中医药大学相关规定及科学伦理规范进行,广西中医药大学实验动物伦理委员会对实验进行审批及监管。

    1.2 主要试剂RIPA细胞裂解液(C1053,北京普利莱基因技术有限公司);BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)(E-BC-K318-M,Elabscience);内参一抗：Mouse Anti-β-Actin(HC201,TransGen Biotech,1/2000);二抗：HRP conjugated Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (GB23301,Servicebio,1/2000);目的一抗：Rabbit Anti IKKβ (AF6009,Affinity,1/1000) ......