王春旭,王彦文,黄辉,唐勇,邓洁妤,贺漓漓

    (广西桂林市疾病预防控制中心检验科,广西桂林 541001)

    沙门菌作为导致食源性疾病的重要致病菌之一,广泛分布于自然界,因易污染食品、水等外环境以及存在于一些带菌的禽畜类动物中,通过食物链传递给人类,危害公共卫生健康[1-2]。我国每年约有上亿人因感染沙门菌而患病,占食源性疾病致病菌首位[3-5]。桂林市历年食源性风险监测中也以沙门菌检出为最多[6-7]。为了进一步揭示桂林市沙门氏菌的血清型分布及其耐药性和基因型,桂林市疾病预防控制中心实验室对2019年检出的32株沙门氏菌和2020年检出的37株沙门氏菌进行了血清型的鉴定和菌株的耐药性分析,同时采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)对其进行分子分型研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料所分析的沙门菌菌株来自2019年收集的32株(其中21株为桂林市食源性致病菌监测的分离株,11株为同年腹泻患者检出菌株)和2020年收集的37株(其中21株为桂林市食源性致病菌监测的分离株,16株为同年腹泻患者检出菌株);所有菌株均经由广西壮族自治区疾病预防控制中心微生物实验室进行复核和血清学分型鉴定。血清型的质控菌株为鼠伤寒沙门菌ATCC14028(中国普通微生物菌种保藏管理中心提供),药敏试验质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922(中国普通微生物菌种保藏管理中心提供),脉冲场凝胶电泳使用的分子量标准菌株为沙门菌H9812(广西壮族自治区疾病预防控制中心提供)。

    1.2 仪器及试剂全自动细菌鉴定仪(法国生物梅里埃公司);全自动药敏试验菌液接种判读仪(Thermo赛默飞世尔);CHEF Mapper XA脉冲场电泳仪(美国Bio-Rad公司);Gel Doc XR+全自动凝胶成像系统(美国Bio-Rad公司)。沙门菌显色培养基(法国科玛嘉CHROMagar,生产批号P002060);诱导培养基(法国科玛嘉CHROMagar,生产批号20201201);沙门菌诊断血清(丹麦SSI公司,生产批号20200701);革兰阴性需氧菌药敏检测板(中国上海星佰生物技术有限公司,生产批号102012);蛋白酶K(德国Merck公司,生产批号VL558866);GelRed染液(美国Biotium公司,生产批号19G0326);Seakem Gold琼脂糖(美国Cambrex公司,生产批号0000990000);Xba I限制性内切酶(NEW England公司,生产批号AL12042A)。

    1.3 方法

    1.3.1 食源性疾病病例信息与相关样本采集对于食源性疾病病例个案信息按照《2019年国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》[8]收集,同时采集患者的新鲜粪便或肛拭子标本进行沙门菌检验,对阳性的沙门菌分离株再进行PFGE分子分型分析和药敏试验 ......