三磷酸胞苷对脑缺血大鼠脑源性神经营养因子的影响
【中图分类号】：R743.3 【文献标识码】：A
【文章编号】： 1004-597X(2007)12-0015-02
【摘要】 目的：观察CTP对局灶脑缺血大鼠BANF表达的影响。方法：应用免疫组化方法观察不同缺血时间CTP治疗组及脑缺血组BDNF阳性细胞数，并进行图像分析。结果：CTP组及缺血组BDNF两组细胞形态无明显不同，但CTP治疗组阳性细胞数显著高于相应缺血对照组。结论：三磷酸胞苷可提高大鼠局灶脑缺血半暗带区BDNF的表达水平。
【关键词】 脑源性神经营养因子；脑缺血；大鼠
The influence of cytidine triphosphate on brain-derived neurotrophic factor after cerebral ischemia in rats
LI Yu-chen, DONG Yu-juan, WANG Jian-ru, WANGBing
【Abstract】 ObjectiveTo observe the influence of cytidine triphosphate on expression of brain-derived neurotrophic factor after focal cerebral ischemia in rats. MethodsBDNF positive neurons number of CTP treated group and cerebral-ischemic group in different time was determined with method of immunohistochemistry, and the picture analysis was measured. ResultsThe expressionlevels of BDNF in CTP treated groups were higher than those in cerebral-ischemic groups, but they were same shapes of cell in those groups.Conclusions CTP increased the expression level of BDNF around the necrotic area after cerebral ischemia in rats.
【key words】 Brain-derived neurotrophic factor;Cerebral ischemia;Rat
近年研究表明三磷酸胞苷(Cytidine Triphosphate，CTP)为一种促进神经细胞修复和再生的药物。本研究用大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型研究CTP对局灶脑缺血脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)表达的影响，借以观察CTP对缺血损伤脑组织可塑性的影响。
1 材料与方法
SD大鼠96只，随机分为正常对照组、假手术组、缺血组及CTP组。采用颈内动脉线栓法制作局灶性脑缺血模型。CTP组应用CTP腹腔注射，剂量0.7mg/kg，每日一次。缺血组及CTP组分别在缺血6h、24h、3d、5d及7d取材，正常对照组及假手术组则均在实验开始后第7日取材，BDNF免疫组化染色采用ABC法。图像分析：取视交叉水平的脑片置于400倍纤维镜下观察，计算机自动计数每视野阳性细胞数。对以上所获得的数据进行统计学处理，实验组及假手术组与正常对照组均数比较采用单因素方差分析，缺血组与CTP组之间均数比较采用配对t检验。
2 结果
CTP治疗后，BDNF阳性神经元数量显著增加。缺血组与CTP组配对t检验结果显示，CTP治疗组BDNF阳性神经元数显著高于相应缺血对照组，P<0.001。假手术组与正常对照组比较P>0.05，二组间无显著差异；单因素方差分析显示，CTP组与正常对照组比较，P<0.001。
3 讨论
BDNF是1982年Barde及其同道由猪脑提取液获得的一种神经营养因子，主要分布在中枢神经系统，周围神经系统等区域也有少量分布[1]，其功能为促进和维持一级感觉神经元的存活和突起的生长。CTP系核苷酸类衍生物[2]，研究表明CTP具有多种药理作用：(1)神经营养作用：CTP可促进神经细胞的物质、能量代谢，支持神经元存活，延缓神经细胞衰老，提高细胞的抗损伤能力，促进神经突起的生长。(2)调节物质代谢作用：作为原料及能量物质，可促进细胞内磷脂、脂肪以及核酸和蛋白质的合成代谢。调节细胞生物膜性结构的合成与改建[3]，增强细胞的生物活性，提高神经细胞膜的合成率[2]。(3)抗血管硬化作用：调节血管壁细胞的磷脂、核酸和蛋白质代谢，增强血管细胞的活性及再生和修复能力，提高细胞的抗损能力，改善支配血管的神经功能，延缓血管硬化。大鼠局灶脑缺血后，缺血中心区的神经元很快即可陷入不可逆性坏死，而其周边部存在半暗带，半暗带区神经元呈缺血改变，若不加以干预，随着缺血时间延长，坏死中心区不断向周围扩大，半暗带区不断缩小。本实验表明，应用CTP治疗后，半暗带区BDNF表达明显增强，对缺血大脑组织起到支持存活、延缓死亡、增强修复再生能力的作用。由此可见，CTP能有效阻止梗塞灶进一步扩大，及时提高内源性BDNF表达水平，对治疗脑缺血，保护受损神经元，实现神经功能的重塑具有重要意义。
参考文献
[1] 程道宾，王进，罗杰峰，等. 脑源性神经生长因子与缺血性脑损伤. 中国医学文摘. 老年医学，2005，14(4)：239～242
[2] Monroe PJ. Hawranko AA, Smith DL, at al. Biochemical and pharmacological characterization of multiple beta-endorphinergic antinociceptive systems in the rat periaqueductal gray. J Pharmacol Exp Ther, 1996, 276: 65-73.
[3] Heinricher MM, Morgan MM, Tortorici V, et al. Disinhibition of off-cells and antinociception produced by an opioid action with the rostral ventromedial medulla. Neuroscience, 1994, 63: 279-288
作者单位： 050000 河北医大第三医院
李育臣 董玉娟 王建茹 王 冰, http://www.100md.com(李育臣 董玉娟 王建茹 王 冰)
【文章编号】： 1004-597X(2007)12-0015-02
【摘要】 目的：观察CTP对局灶脑缺血大鼠BANF表达的影响。方法：应用免疫组化方法观察不同缺血时间CTP治疗组及脑缺血组BDNF阳性细胞数，并进行图像分析。结果：CTP组及缺血组BDNF两组细胞形态无明显不同，但CTP治疗组阳性细胞数显著高于相应缺血对照组。结论：三磷酸胞苷可提高大鼠局灶脑缺血半暗带区BDNF的表达水平。
【关键词】 脑源性神经营养因子；脑缺血；大鼠
The influence of cytidine triphosphate on brain-derived neurotrophic factor after cerebral ischemia in rats
LI Yu-chen, DONG Yu-juan, WANG Jian-ru, WANGBing
【Abstract】 ObjectiveTo observe the influence of cytidine triphosphate on expression of brain-derived neurotrophic factor after focal cerebral ischemia in rats. MethodsBDNF positive neurons number of CTP treated group and cerebral-ischemic group in different time was determined with method of immunohistochemistry, and the picture analysis was measured. ResultsThe expressionlevels of BDNF in CTP treated groups were higher than those in cerebral-ischemic groups, but they were same shapes of cell in those groups.Conclusions CTP increased the expression level of BDNF around the necrotic area after cerebral ischemia in rats.
【key words】 Brain-derived neurotrophic factor;Cerebral ischemia;Rat
近年研究表明三磷酸胞苷(Cytidine Triphosphate，CTP)为一种促进神经细胞修复和再生的药物。本研究用大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型研究CTP对局灶脑缺血脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)表达的影响，借以观察CTP对缺血损伤脑组织可塑性的影响。
1 材料与方法
SD大鼠96只，随机分为正常对照组、假手术组、缺血组及CTP组。采用颈内动脉线栓法制作局灶性脑缺血模型。CTP组应用CTP腹腔注射，剂量0.7mg/kg，每日一次。缺血组及CTP组分别在缺血6h、24h、3d、5d及7d取材，正常对照组及假手术组则均在实验开始后第7日取材，BDNF免疫组化染色采用ABC法。图像分析：取视交叉水平的脑片置于400倍纤维镜下观察，计算机自动计数每视野阳性细胞数。对以上所获得的数据进行统计学处理，实验组及假手术组与正常对照组均数比较采用单因素方差分析，缺血组与CTP组之间均数比较采用配对t检验。
2 结果
CTP治疗后，BDNF阳性神经元数量显著增加。缺血组与CTP组配对t检验结果显示，CTP治疗组BDNF阳性神经元数显著高于相应缺血对照组，P<0.001。假手术组与正常对照组比较P>0.05，二组间无显著差异；单因素方差分析显示，CTP组与正常对照组比较，P<0.001。
3 讨论
BDNF是1982年Barde及其同道由猪脑提取液获得的一种神经营养因子，主要分布在中枢神经系统，周围神经系统等区域也有少量分布[1]，其功能为促进和维持一级感觉神经元的存活和突起的生长。CTP系核苷酸类衍生物[2]，研究表明CTP具有多种药理作用：(1)神经营养作用：CTP可促进神经细胞的物质、能量代谢，支持神经元存活，延缓神经细胞衰老，提高细胞的抗损伤能力，促进神经突起的生长。(2)调节物质代谢作用：作为原料及能量物质，可促进细胞内磷脂、脂肪以及核酸和蛋白质的合成代谢。调节细胞生物膜性结构的合成与改建[3]，增强细胞的生物活性，提高神经细胞膜的合成率[2]。(3)抗血管硬化作用：调节血管壁细胞的磷脂、核酸和蛋白质代谢，增强血管细胞的活性及再生和修复能力，提高细胞的抗损能力，改善支配血管的神经功能，延缓血管硬化。大鼠局灶脑缺血后，缺血中心区的神经元很快即可陷入不可逆性坏死，而其周边部存在半暗带，半暗带区神经元呈缺血改变，若不加以干预，随着缺血时间延长，坏死中心区不断向周围扩大，半暗带区不断缩小。本实验表明，应用CTP治疗后，半暗带区BDNF表达明显增强，对缺血大脑组织起到支持存活、延缓死亡、增强修复再生能力的作用。由此可见，CTP能有效阻止梗塞灶进一步扩大，及时提高内源性BDNF表达水平，对治疗脑缺血，保护受损神经元，实现神经功能的重塑具有重要意义。
参考文献
[1] 程道宾，王进，罗杰峰，等. 脑源性神经生长因子与缺血性脑损伤. 中国医学文摘. 老年医学，2005，14(4)：239～242
[2] Monroe PJ. Hawranko AA, Smith DL, at al. Biochemical and pharmacological characterization of multiple beta-endorphinergic antinociceptive systems in the rat periaqueductal gray. J Pharmacol Exp Ther, 1996, 276: 65-73.
[3] Heinricher MM, Morgan MM, Tortorici V, et al. Disinhibition of off-cells and antinociception produced by an opioid action with the rostral ventromedial medulla. Neuroscience, 1994, 63: 279-288
作者单位： 050000 河北医大第三医院
李育臣 董玉娟 王建茹 王 冰, http://www.100md.com(李育臣 董玉娟 王建茹 王 冰)