玄参有效成分及药理和种质资源指纹图谱研究进展(2)

http://www.100md.com 2010年6月1日 钟晓明 黄真 李兆翌 张春椿

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     此外，玄参不同提取物对心血管系统的影响主要表现在扩张冠状动脉[6]、降血压[7]、抗血小板聚集[8]、促进纤溶[9]、改善血液流变性[10]及抗脑缺血损伤[11]作用。

    2 玄参种质资源指纹图谱

    2.1 HPLC指纹图谱 白志川[12]采用HPLC法测定了重庆市武隆县玄参等10个不同产地玄参样品，建立了不同产地玄参药材甲醇溶解部分的HPLC指纹图谱共有模式，并对不同产地药材进行了相似度比较。10批不同产地的玄参药材样品指纹图谱的特征性和专属性很强，9个共有峰的稳定性很好。10批玄参药材样品指纹图谱的平均相似度为0.888，符合国家有关部门的要求。每个样品的非共有峰面积占总峰面积均小于10%，符合指纹图谱的要求。孙国祥等[13]采用水提醇沉法提取玄参药材，建立了玄参药材的HPLC指纹图谱，并以“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0”软件进行评价，采用系统指纹定量法评价了不同产地玄参药材质量，为玄参整体化学成分质量控制提供了新方法。目前，通过玄参的指纹图谱数据进行分析，评价玄参内在质量方面作用更为全面，通过对指纹图谱部分主要特征峰的分析 ，可以初步揭示指纹图谱与药材之间的关系，有助于玄参药材的标准化种植及质量控制。

    2.2 DNA 指纹图谱 制备高纯度、质量好的总DNA是进行DNA多态性分析的前提，肖冰梅等[14]对四川省白川县、宝庆县和广东、浙江4个不同产地的玄参药材，分别采用SDS法和CTAB法提取药材玄参总DNA，并对其进行核酸含量测定和电泳检测。结果显示，采用SDS法提取的总DNA其OD260/OD280 =1.83，而采用CTAB法提取的总DNA其OD260/OD280 = 1.64；DNA电泳检测显示采用SDS法提取的总DNA条带清晰，而采用CTAB 法提取的总DNA出现严重的拖尾现象。表明用SDS法提取药材玄参总DNA优于CTAB 法，可能与采用的样品是干燥的药材有关，玄参经由“发汗”干燥而成，在“发汗”过程中其所含的糖类、酰胺及环烯醚萜苷类等成分会发生降解，从而对CTAB法提取DNA造成较大干扰。陈大霞等[15]从分子水平上研究玄参3种栽培类型的遗传关系和遗传多样性。对玄参3种不同栽培类型的92个单株进行SRAP分析，运用POPGENE version l.31软件计算相关参数，采用UPGMA聚类法进行聚类分析。结果表明，栽培玄参的遗传多样性居中等水平，且栽培类型间的遗传差异大于栽培类型内的遗传差异。赵志新等[16]采用5因素(dNTPs、Taq DNA聚合酶、MgCl2、引物及模板)5水平正交设计筛选PCR体系，并利用单因子梯度进一步优化反应体系各因素浓度和扩增程序，从而建立了适合玄参的ISSR-PCR反应体系，为采用ISSR-PCR分子标记技术研究玄参种质资源遗传多样性提供了技术依据。

    3 展望

    近年来，学者们对玄参的研究已经比较深入，现代药理研究发现玄参一些不明成分的生物活性及其作用机制如改善内毒素血病症、镇痛、镇静等作用。但玄参的药理活性方面的研究仍多限于药物有效部位的药效学研究，药物代谢动力学研究较少且作用机制多不清楚。因此，玄参的作用机制研究和有效部位、有效成分的进一步深化研究亟待加强。

    目前，对玄参指纹图谱研究主要集中于使用高效液相色谱的方法，可解决不同产地药材与对照指纹图谱的总体含量差异的评估问题，而对其分子指纹图谱的研究才逐渐兴起。玄参作为一种重要的药用植物，应合理开发与利用其种质资源，开发与保护并重，收集野生玄参种质及国内各地的地方种、特色种扩大其遗传基础，建立种质资源谱以保存尽可能多的遗传多样性，为玄参品种选育奠定物质基础。

    参考文献

    [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京： 化学工业出版社，2010：108.

    [2] 张建春，朱建美.玄参的化学成分与药理活性研究进展[J].山东医药工业，2003，22(1)：25-26.

    [3] 俞静静，陈素红，吕圭源.玄参“凉血滋阴”药效相关研究概况[J].中国实验方剂学杂志，2007，13(9)：63-66.

    [4] GARGHS.凯氏玄参中抗肝病毒性和免疫刺激成分环烯醚萜苷类[J].Phytother Res，1994，8(4)：224-228.

    [5] 胡瑛瑛，黄真.玄参的化学成分及药理作用研究进展[J].浙江中医药大学学报，2008，32(2)：268-270.

    [6] 龚维桂，钱伯初，许衡钧，等.玄参对心血管系统药理作用的研究[J].浙江医学，1981，3(1)：11-13.

    [7] 杨秀英，毛小平，毛晓健，等.丹参苦参与藜芦配伍前后对血压的影响[J].云南中医学院学报，1998，21(5)：46.

    [8] 李医明，曾华武，贺祥，等.玄参中环烯醚萜苷和苯丙素苷对L TB4产生及血小板聚集的影响[J].第二军医大学学报，1999，20(5)：301-303.

    [9] 倪正，蔡雪珠，黄一平，等.玄参提取物对大鼠血液流变性、凝固性和纤溶活性的影响[J].中国微循环，2004，8(3)：152-153.

    [10] Huang Q， Gong Q Y， Yao M H， et al. Protective effect of Scrophularia ningpoensis extracts on cerebral ischemia injury in rats[J] ......

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