狗声带射频消融后的连续病理变化研究
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[摘 要] 目的 通过观察射频消融狗声带后的连续病理切片，探讨射频消融的范围、深度，以及射频消融后声带的病理修复过程，为临床使用提供依据。方法 4只健康成年狗，在全麻下行直达喉镜下左声带插入式探针射频消融，右声带接触式探头射频消融，并分别于术后当时、1、2、4周取全喉HE染色，病理连续切片，显微镜下观察消融范围、深度及修复过程。结果 手术当时呈现无菌性炎症反应，1周时接触式侧表面上皮脱落，有肉芽组织增生，插入式侧表面上皮脱落，溃疡形成，深达横纹肌。2周时以纤维母细胞和新生血管为特征的肉芽组织。4周时表面上皮修复，固有层纤维组织增生伴胶原化，镜下结构均趋于稳定。结论 接触式射频消融范围局限，适合于局限于粘膜层的声带病变的治疗，插入式射频消融可达到肌层，适合于有深部侵犯的声带病变的治疗。
关键词：射频消融 声带 病理
中图分类号：R767.4 文献标识码：B 文章编号：1004-7484(2011)03-0039-03
射频治疗用于医学领域已经有30多年历史，目前耳鼻咽喉科常用来行鼻腔、咽喉等部位手术，我们用单极射频行狗声带射频消融，并连续观察术后不同恢复时间的病理变化，探讨射频消融范围、深度，以及术后不同恢复时间的病理变化和修复状况，以便为临床工作作参考。
1 试验方法和技术路线
1.1 动物实验
选择4只成年杂交狗，体重约15kg，雌雄不限。在全麻下行直达喉镜下左声带插入式探针射频消融，射频机器为西安万智电子技术有限公司生产的XVC-Ⅱ型微电脑射频治疗仪，接触时间5秒，功率6挡，功率80W，探针截面积4mm2，插入深度5mm；右声带接触式探头射频消融，接触时间5秒，功率6挡，功率80W，探头接触面积6mm2，术后观察狗呼吸、吞咽及发声功能的恢复情况，并分别于手术当时及术后1、2、4周将狗处死，取全喉，立即放入10%福尔马林中固定，石蜡包埋，切片厚4μm，HE染色，病理连续切片，显微镜下观察消融范围、深度及修复过程。
2 结果
术后实验狗呼吸通畅，吞咽良好，1～2周即能恢复犬吠，全部未行气管切开，健康存活。病理检查显示手术当时其创面及周围组织首先呈现无菌性炎症反应，接触式其周围反应仅仅局限于粘膜层，插入式探针周围反应可达数十层细胞，局部焦痂较少。1周时接触式探针射频消融侧出现表面上皮脱落，可见肉芽组织增生；插入式探针射频消融侧出现表面上皮脱落，溃疡形成，深达横纹肌，部分横纹肌组织坏死。2周时可观察到以纤维母细胞和新生血管为特征的肉芽组织，插入式探针射频消融侧可见软骨组织部分破坏。4周时表面上皮修复，固有层纤维组织增生伴胶原化，镜下结构均趋于稳定(见图1、2)。
3 结论
射频消融的深度根据作用方式和作用时间的不同可达到声带的粘膜层、固有层及肌层，实验中单次持续5秒、功率80W的接触式射频一般损伤局限于粘膜层，单次持续5秒、功率80W的插入式射频周围深度一般约 nm，如果需消融到固有层及肌层，需插入式射频消融。最终在4周内可达到基本或完全修复。射频消融未对狗的呼吸和吞咽功能产生明显的影响。
4 讨论
射频的原理是指能够进行能量相干电离辐射的电磁波，由交变的电场和磁场所组成。电流可产生以下的生物学效应。一、热效应：射频电流使局部发热，导致温度升高，使得细胞内、外液蒸发，局部组织发生凝固性坏死，这种局部细胞成分破坏和组织凝固性坏死，是我们临床应用的病理学基础，是利用电磁波作用于人体组织产生内生热效应，利用较低温度(60-80度)使组织蛋白凝固，通过血栓形成使治疗处的血管闭塞，组织萎缩、坏死脱落，重新修复而达到治疗目的。射频的热效应产生的速度快，对组织的损伤非常局限，因而对个体的生理功能影响较小。二、电离效应：直流电流可产生电离效应，应用直流电时，细胞中电解质成分可在两极间运动，产生电离效应，但射频电流为交变电流，不产生电离效应。三、法拉第效应：生物组织在50-100Hz的交流电通过时可产生最大的电感效应，当频率大于300kHz时此种效应基本消失。临床应用的射频是一种高频电流，常用300-1000kHz，有可控脉冲时限和输出功率。射频作用于组织时主要依据其产生的热效应[1，2，3]。
在动物实验中发现，在接触式射频消融侧，损伤一般局限于粘膜层，很少突破到肌层[4]，而喉乳头状瘤、声带白斑、喉角化症、轻度和中度上皮内瘤变等病变一般位于声带的粘膜层，我们在临床上，使用支撑喉窥镜手术治疗以上病变，切除病变后，常使用射频接触式烧灼其基底部，以便去除残余的病变，正是利用了射频的损伤一般不突破粘膜层的特点，可以达到既可彻底去除病变，又没有损伤到粘膜层以下组织的特性[5]。当治疗高度上皮内瘤变(原位癌)及其他早期喉癌时，切除病变后，用反复、多点插入式射频烧灼其基底部，使基底部组织凝固坏死，可深达肌层甚至骨组织，以达到彻底切除肿瘤的目的[6]。射频消融后组织坏死，随即肉芽增生，最后达到瘢痕修复，这与临床观察一致。射频消融后在手术创面涂以金霉素软膏，可减少肉芽增生，促使周围粘膜及瘢痕组织向创面修复。
综上所述，通过不同的射频消融方式和作用时间，可以控制消融的深度和范围，射频消融后组织发生无菌性炎症反应，上皮脱落坏死，肉芽组织增生，最后表面上皮修复，固有层纤维组织增生伴胶原化。临床上可用接触式射频消融方式治疗局限于上皮层的喉部病变，使用反复、多点插入式射频消融治疗有深部侵犯的喉部病变，且具有安全有效的特点。当然，不同的射频仪其输出功率、作用方式和作用时间均不尽相同，临床使用前合理设计动物实验，掌握仪器性能，可以更好地帮助临床推广。
参考文献
[1] 李虹义， 朱伟良， 万友华，等. 射频消融对各级支气管的影响[J].第四军医大学学报，2008， 29(14): 1279-1281.
[3] 万京明.等离子射频联合改良悬雍垂腭咽成形术治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征50例[J] ......
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