不同产地栽培甘草含量测定研究(2)
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2.1.5 线性关系考察。分别取甘草苷对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml置10ml容量瓶中，加10%KOH溶液1ml，摇匀使之充分反应，反应时间为20min，反应后加70%乙醇定容，摇匀，备用，在200～700nm处进行全波长扫描，分别测定在402nm和425 nm处的吸光度，结果为：吸收波长在402nm时的标准曲线为：A=17.608C+0.0797(r=0.9986)；吸收波长在425 nm时的标准曲线为：A=13.881C+0.0664(r=0.9978)。从此结果来看，无论是402 nm还是425nm，在0.0581～0.2905mg范围内，线性关系皆良好。
2.1.6 加样回收率考察。取已知总黄酮含量的样品溶液2ml，加入同量的甘草苷溶液1ml，摇匀后测定总黄酮的量，平行制备5份，计算平均回收率为104.6%，RSD=2.1%(n=6)。
2.1.7 精密度考察。取同一供试品溶液，分别放置0、5、10、20、30、60min，连续测定5次，结果为RSD =1.80%。结论为仪器精密度良好。
2.1.8 重现性考察。精密称取同一供试品5份，依法测定，结果测得RSD = 0.97%。
2.2 甘草苷的含量测定
依据文献[1]进行。方法学考察结果符合含量测定要求。
2.3 甘草酸的含量测定
依据文献[1]进行。方法学考察结果符合含量测定要求。
2.4 样品测定
取各种甘草样品，依法操作，并计算样品中总黄酮、甘草苷和甘草酸的含量，测定结果见表1。
结果是，不同产地、不同生长年限的药材主要化学成分含量差别还是比较大的；9份样品中，甘肃饮马农场3年生样品总黄酮、甘草苷、甘草酸含量皆为最高，质量最佳。
3讨论
作者曾参考文献[9]，以甘草苷为对照品，研究了盐酸-镁粉显色法测定总黄酮的含量，对镁粉的用量、反应时间、稳定性、线性关系、精密度、重现性等进行了考察，该方法稳定性，精密度，线性和重现性均良好，但是该方法测定的总黄酮的含量比甘草苷的含量还要低，遂判断此方法不适宜测定甘草总黄酮的含量。也以甘草苷为对照品，研究了不显色直接测定法、亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法、5%三氯化铝显色法，结果都不理想，线性关系很差。采用氢氧化钾法是比较合适的，结果也比较准确。
从试验结果可以看出，不同产地、不同生长年限的药材主要化学成分含量差别还是比较大的。按照药典[1]要求，6～9号样品的甘草苷含量是不符合标准的，但是总黄酮含量并不低。9份样品中，甘肃饮马农场3年生样品总黄酮、甘草苷、甘草酸含量皆为最高，质量最佳。此方法在化学方面，为全面、有效地控制甘草药材质量提供了科学依据。
参考文献
[1] 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典,I部[S].北京:中国医药科技出版社,2010, 80～81.
[2] 张志东,楚敏,宋素琴,等.SP825 大孔树脂静态吸附甘草总黄酮的研究[J].农产品加工,2007,8:15～16.
[3] 但建明,李文娟,洪成林,等.甘草渣中黄酮类化合物的提取工艺研究[J].石河子大学学报(自然科学版),2006,24(4):427～428.
[4] 于琴,董文宾,王顺民,等.甘草渣中黄酮类成分提取工艺的研究[J].食品工业,2005,3: 20～22.
[5] 付博强,刘劼,王小如,等.XDA～1大孔吸附树脂对甘草酸及甘草总黄酮的吸附分离[J].现代中药研究与实践,2004,18(增刊):45～48.
[6] 李红,李炳奇,刘红,等.XDA-1型树脂对甘草黄酮吸附-解吸效果的研究[J] ......
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