胃癌组织中EB病毒EBV的表达及其影响因素
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【摘要】 目的 研究胃癌组织中EB病毒的表达及其影响因素。方法 选择胃癌组织和癌旁组织,检测EBV蛋白水平表达量的变化情况,并对影响因素进行Logistic回归分析。结果 胃癌组织中EBV的蛋白水平明显高于对照组;EBV表达量升高与吸烟史、酗酒史和精神状态呈正相关,与饮食习惯呈负相关。结论 胃癌组织中EB病毒(EBV)的表达量明显升高,并且与饮食因素、精神因素、吸烟、酗酒密切相关。
【关键词】 胃癌;EB病毒;相关性
胃癌是常见的消化道肿瘤,寻找有效的早期诊断指标对于改善胃癌患者的预后具有积极的临床价值。近年来的研究发现,EB病毒(EBV)感染与多种肿瘤密切相关。在此为了进一步探讨胃癌组织中EBV表达及其影响因素,笔者将研究结果汇报如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2007年6月——2011年6月在我院行胃大部切除的80例胃癌患者作为研究对。术后收集胃癌组织样本作为观察组、癌旁组织作为对照组,立即投入液氮保存。
1.2 观察指标
1.2.1 一般情况 采用问卷调查的形式了解患者的年龄层次、饮食习惯、吸烟史、酗酒史、焦虑和抑郁的精神状况,并按下列标准进行二分类量化:年龄:<40岁=0、≥40岁=1;饮食习惯:不规律=0、规律=1;吸烟史:无=0、有=1;酗酒史:无=0、有=1;精神状况:HAMA评分<18、HAMD评分<16=0。
1.2.2 免疫组织化学 石蜡包埋切片脱蜡至水、抗原修复,加1:50羊来源的EBV抗体孵育1h后,PBS洗2遍、加HRP标记的驴抗羊二抗,孵育1h;PBS洗3遍DAB显色10min,蒸馏水洗3min后苏木素衬染10min,吹干,中性树胶封片,镜下观察。
1.2.3 双向凝胶电泳和Western Blot 按配方配置10%的下层胶和5%的下层胶。垂直电泳结束后取出凝胶进行电转膜,封闭后加入羊来源的EBV第一抗体,4℃孵育过夜。TBST洗3遍,加HRP标记的驴抗羊二抗孵育1h,而后进行显影。
1.3 统计学方法 采用SPSS18.0软件对上述数据进行统计学分析,单因素分析采用t检验、卡方检验,多因素分析采用以EBV变化作为应变量的Logistic回归分析,检验标准P<0.05。
2 结果
2.1 两组样本EVB的表达情况 根据免疫组化结果,胃癌组织中EVB强阳性48例、弱阳性26例、阴性6例,EVB的蛋白水平(196.32±20.65);癌旁组织中EVB强阳性19例、弱阳性18例、阴性43例,EVB的蛋白水平100。胃癌组织EVB阳性率及蛋白水平均明显高于癌旁组织。
2.2 胃癌组织中EVB表达水平影响因素的多因素分析 以胃癌组织中EVB表达量的变化作为应变量进行logistic分析可知,EVB表达量升高与年龄因素无明显关系,与吸烟史、酗酒史和精神状态呈正相关,与饮食习惯呈负相关(P<0.05)。
3 讨论
胃癌是消化道肿瘤中最常见的一种疾病,但是由于早期诊断较为困难,使得大多数患者需要通过胃癌根治术来进行治疗[1],寻找有效的早期诊断指标对于改善胃癌患者的预后具有积极的临床价值[2]。EBV通过相关病毒蛋白吸附于B细胞表面,感染、转化B细胞并使之转化为永生性细胞系,进而引起一系列淋巴系统恶性肿瘤。近年来随着对EBV认识的深入,广大学者还发现EBV基因组的存在可见于胃癌、乳腺癌、肝细胞癌、平滑肌肿瘤[3]。特别是各种病理类型的胃癌组织,包括高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌和印戒细胞癌等,均与EBV的感染有密切关系[3]。
在上述研究中,通过免检测EBV的表达情况可知胃癌组织中EVB的蛋白水平明显高于对照组。这就进一步验证了EBV基因组在胃癌的发生发展过程中起着至关重要的作用。胃癌的发生与年龄、饮食因素、精神因素以及吸烟、饮酒等密切相关[4],为了进一步探讨这些因素对于尿素酶EBV基因组表达量的影响,笔者进行了多因素分析。我们以EBV的表达量为应变量进行了logistic回归分析,由结果可知EVB表达量升高与年龄因素无明显相关关系,与吸烟史、酗酒史和精神状态呈正相关,与饮食习惯呈负相关。这就说明吸烟、酗酒以及焦虑抑郁情绪可以促进EVB的表达,是胃溃疡发生的危险因素;规律饮食可以抑制EVB的表达,是胃溃疡发生的保护因素。
综合以上讨论我们可以得出结论,胃癌组织中EVB的表达量明显升高 ......
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