肿瘤坏死因子α对髓核细胞Ⅱ型胶原基因表达影响(1)
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【摘要】目的研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠髓核细胞Ⅱ型胶原基因表达的调节作用。方法通过酶消化法原代培养大鼠髓核细胞,然后将髓核细胞随机分为4组:TNF-α刺激组,P38MAPK阻断组,P-JNK/SAPK阻断组和对照组。利用RT-PCR检测髓核II型胶原的表达。结果TNF-α刺激组,P38MAPK阻断组,P-JNK/SAPK阻断组和对照组比较,Ⅱ型胶原基因表达明显减少。结论TNF-α能够抑制髓核细胞Ⅱ型胶原表达。
【关键词】TNF-α;胶原;基因表达;髓核
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2013.11.084文章编号:1004-7484(2013)-11-6357-02
椎间盘主要是由髓核、纤维环和上下软骨终板组成。椎间盘的退变是椎间盘退变性疾病的重要原因。TNF-α是导致椎间盘退变乃至椎间盘源性腰腿痛的重要物质[1-2],通过研究发现,TNF-α可诱导髓核细胞凋亡[3],从而对胶原等细胞外基质的产生及调控方面意义重大,是与胶原代谢关系非常密切的细胞因子。本实验研究TNF-α对髓核细胞Ⅱ型胶原表达的影响。1资料与方法
1.1动物出生24h SD大鼠,SPF级,青岛市药检所。
1.2主要试剂TNF-α购自Sigma公司,TRNzol A+购自TIANGEN公司,琼脂糖构造Ameresco公司,溴化乙锭(EB)购自Boehringer Mannheim公司,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒购自Promega公司;p38MAPK特异性阻断剂(SB203580)及JNK特异性阻断剂(SP600125)均购自上海碧云天生物技术有限公司 ......
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