深低温冻存羟基磷灰石/BMSCs修复兔桡骨缺损的实验研究
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【摘 要】目的：通过深低温冻存自行构建的人工植骨材料多孔羟基磷灰石(hydroxyapatite ceramic, HA)/骨髓间充质干细胞(bone marrow- derived mesenchymal stem cells, BMSCs) 修复兔桡骨缺损，探讨深低温冻存(Cryopreservation)方法对保存HA复合植骨材料的可行性，以方便临床使用。方法：应用自行构建的BMSCs/HA人工植骨材料在- 80℃保存3个月后修复兔桡骨10mm缺损模型，同时以未行低温冻存的HA/BMSCs及单纯的HA分别为对照组1和2。分别在第8周进行大体观察、X线观察和HE染色等组织学观察。结果： BMSCs与HA构建出人工植骨材料，BMSCs在HA表面生存良好。X线观察三组模型在术后第8周，人工植骨材料与骨缺损断端的界限被中密度影响充填。三组模型在术后8周实验组和对照1组新生骨痂明显多于对照2组，部分与骨缺损断端借新生骨组织连接。结论：低温冻存的复合植骨材料的骨缺损修复能力与新制作的复合材料几乎一致，没有因为冻存而受到影响。
【关键词】骨髓间充质干细胞；羟基磷灰石；支架材料复合物；低温冻存；桡骨缺损
【中图分类号】R 318.08 【文献标识码】A 【文章编号】1004- 7484(2012)05- 0184- 02 x±s标准差表示；组间计量资料行配对t检验，P<0.05为有统计学意义。
2 实验结果
2.1 HA复合成骨诱导后BMSCs构成的复合植骨材料
应用成骨诱导的BMSCs与多孔HA共培养7天后，扫描电位观察BMSCs在HA表面的生长状态。在多孔HA的表面，可见BMSCs伸出了突起，相互接触，彼此连接成片，有的细胞已经伸入到HA的孔隙内。在部分BMSCs之间有丝状纤维连接，在细胞表面也可见到有大小不等的白色钙质颗粒(1B)。复合植骨材料冻存并复苏后，多孔HA的表面及孔隙内的BMSCs的状态与冻存前并没有明显的区别，细胞也没有从HA表面脱落的趋势(1C)。
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