一例鼠伤寒沙门菌的检测结果分析
【摘 要】目的：通过对一例鼠伤寒沙门菌感染病例的检测结果分析，为及时确认感染源，对症治疗提供可靠地实验依据。方法：分别采集病人粪便、血液标本，用常规方法进行标本的分离、生化、血清学复核鉴定。结果：确认为鼠伤寒沙门菌感染。结论：此病例系鼠伤寒沙门菌感染所致。
【关键词】伤寒沙门氏菌；鼠伤寒沙门氏菌；误报
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2012)09-0390-02
伤寒是古老的肠道传染病[1]，常由伤寒沙门菌、甲、乙、丙型副伤寒及鼠伤寒沙门菌等肠道致病菌引起，如不及时确诊和控制，造成环境、食品等污染会引起暴发流行。对此类病例实验室病原的确认数据将为临床的诊治和疫情控制提供可靠保障。
2011年5月11日，孝昌县第一人民医院上报了一例感染伤寒沙门氏菌的临床诊断病例。接到报告后，县疾控中心立即对5月5日出现持续三天的不规则发热，最高体温达到39.5度，出现腹痛、腹泻、便血，患者新鲜粪便和血液标本立即送实验室检验。5月15日检验人员经过反复实验和鉴别，病人粪便微生物检测结果为鼠伤寒沙門氏菌，并立即更正了疫情网报。病原学诊断过程如下：
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1 材料和方法
1.1病人新鲜粪便、血液标本各一份
1.2 检测试剂
1.2.1 亚硒酸氢钠增菌培养基(SF)南京一基生化科技有限公司 有效期：20120412
1.2.2 葡萄糖胆盐肉汤培养基 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20111216
1.2.3 哥伦比亚血平板 郑州博赛生物技术股份有限公司 有效期：20110922
1.2.4 SS琼脂 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20120427
1.2.5 MC琼脂 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20111209
, 百拇医药
1.2.6 三糖铁琼脂 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20121023
1.2.7 肠杆菌科细菌生化鉴定管 杭州微生物试剂有效期：20111029
1.2.8 沙门氏菌因子血清 宁波天润生物药业 有效期：20120124
1.3 病人调查：病人的发病史、接触史、生活史、治疗过程。
1.4 检测方法
1.4.1 增菌分离培养[2]
1.4.1.1 血液标本
按1:10加入葡萄糖胆盐肉汤培养基，置于36℃±1℃ 孵育，分别于1d、2d、7d转种血琼脂平板，置36℃±1℃培养24h～48h。
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1.4.1.2 粪便标本
取新鲜粪便标本1g接种于9ml亚硒酸氢钠增菌培养基(SF)，置36℃±1℃培养18h～24h后，接种到SS和MC琼脂平板上，置36℃±1℃、18h～24h分离培养。
1.4.2 初步生化试验
自上述平板上直接挑取数个可疑菌落，分别接种三糖铁琼脂斜面上于36±1℃分别培养18h～24h，观察生化反应。
1.4.3 形态染色
取三糖铁斜面上的菌苔做革兰氏染色。
1.4.4 生化试验
取三糖铁琼脂斜面上的菌苔接种到肠杆菌科细菌生化鉴定管中，于36±1℃分别培养，观察生化反应。
, 百拇医药
1.4.5 血清试验[3]
取符合沙门氏菌的三糖铁斜面上的菌苔做玻片凝集试验，并设盐水对照。挑取三糖铁斜面上菌苔，先用盐水做对照玻片凝集，盐水不凝集，再用O多价血清玻片凝集，O多价血清凝集；再依次用单因子血清做凝集试验，O抗原确定后，再用H因子血清凝集。
2 结果与讨论
2.1 结果
2.1.1 菌落形态
在血平板、MC平板上可见中等大小、无色半透明、表面光滑的菌落，菌落边缘整齐。在SS琼脂培养基平板上可见中等大小、无色半透明、中心黑褐色、表面光滑的菌落，菌落边缘整齐。为革兰氏阴性短杆菌。
2.1.2 生化结果
, 百拇医药
TSI反应结果：斜面不产酸，底层产酸，并产生气体，三糖铁琼脂中间变黑色即产生硫化氢。
生化鉴定：硫化氢+，靛基质-，pH7.2尿素-，氰化钾-，赖氨酸脱羧酶+，赖氨酸+，乌氨酸+，ONPG-，水杨苷-，棉子糖-，动力+。
2.1.3 血清凝集反应
O1、O4单价血清凝集；H抗原第1相i因子凝集，H抗原第2相1,2因子凝集。
2.1.4结果报告
通过菌落形态、革兰氏染色、生化试验、血清玻片凝集试验可以判断此患者感染为鼠伤寒沙门氏菌。
2.2 讨论
2.2.1 医院临床报告患者为伤寒，实验室诊断血清分型时，当多价血清凝集后，伤寒沙门氏菌血清因子未发生凝集现象，又重新对血清因子进行筛查，经过反复多次血清凝集试验，确定此患者为鼠伤寒沙门氏菌感染。
, 百拇医药
2.2.2 通过核查该病人粪便微生物培养记录，发现他们报告的结果为鼠伤寒沙门氏菌，两家实验室检测结果一致，进一步调查发现，由于医院临床医生的疏忽，将鼠伤寒沙门氏菌误报为伤寒沙门氏菌。
2.2.3临床医生的误报，可能影响患者的治愈过程。孝昌县为省级伤寒监测点，09年底曾经暴发过伤寒流行，这种误报可能会引发一系列的应急响应机制。
参考文献：
[1] 李碧华.伤寒菌苗研究现状[J].中国公共卫生杂志，1981；7(1)：35.
[2] WS 280-2008《伤寒和副伤寒诊断标准》.
[3] GB 4789.4-2010《食品安全国家标准-沙门氏菌检验》.
作者简介：
裴银凤,主管技师,孝昌县疾病预防控制中心, 百拇医药
【关键词】伤寒沙门氏菌；鼠伤寒沙门氏菌；误报
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2012)09-0390-02
伤寒是古老的肠道传染病[1]，常由伤寒沙门菌、甲、乙、丙型副伤寒及鼠伤寒沙门菌等肠道致病菌引起，如不及时确诊和控制，造成环境、食品等污染会引起暴发流行。对此类病例实验室病原的确认数据将为临床的诊治和疫情控制提供可靠保障。
2011年5月11日，孝昌县第一人民医院上报了一例感染伤寒沙门氏菌的临床诊断病例。接到报告后，县疾控中心立即对5月5日出现持续三天的不规则发热，最高体温达到39.5度，出现腹痛、腹泻、便血，患者新鲜粪便和血液标本立即送实验室检验。5月15日检验人员经过反复实验和鉴别，病人粪便微生物检测结果为鼠伤寒沙門氏菌，并立即更正了疫情网报。病原学诊断过程如下：
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1 材料和方法
1.1病人新鲜粪便、血液标本各一份
1.2 检测试剂
1.2.1 亚硒酸氢钠增菌培养基(SF)南京一基生化科技有限公司 有效期：20120412
1.2.2 葡萄糖胆盐肉汤培养基 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20111216
1.2.3 哥伦比亚血平板 郑州博赛生物技术股份有限公司 有效期：20110922
1.2.4 SS琼脂 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20120427
1.2.5 MC琼脂 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20111209
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1.2.6 三糖铁琼脂 杭州微生物试剂有限公司 有效期：20121023
1.2.7 肠杆菌科细菌生化鉴定管 杭州微生物试剂有效期：20111029
1.2.8 沙门氏菌因子血清 宁波天润生物药业 有效期：20120124
1.3 病人调查：病人的发病史、接触史、生活史、治疗过程。
1.4 检测方法
1.4.1 增菌分离培养[2]
1.4.1.1 血液标本
按1:10加入葡萄糖胆盐肉汤培养基，置于36℃±1℃ 孵育，分别于1d、2d、7d转种血琼脂平板，置36℃±1℃培养24h～48h。
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1.4.1.2 粪便标本
取新鲜粪便标本1g接种于9ml亚硒酸氢钠增菌培养基(SF)，置36℃±1℃培养18h～24h后，接种到SS和MC琼脂平板上，置36℃±1℃、18h～24h分离培养。
1.4.2 初步生化试验
自上述平板上直接挑取数个可疑菌落，分别接种三糖铁琼脂斜面上于36±1℃分别培养18h～24h，观察生化反应。
1.4.3 形态染色
取三糖铁斜面上的菌苔做革兰氏染色。
1.4.4 生化试验
取三糖铁琼脂斜面上的菌苔接种到肠杆菌科细菌生化鉴定管中，于36±1℃分别培养，观察生化反应。
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1.4.5 血清试验[3]
取符合沙门氏菌的三糖铁斜面上的菌苔做玻片凝集试验，并设盐水对照。挑取三糖铁斜面上菌苔，先用盐水做对照玻片凝集，盐水不凝集，再用O多价血清玻片凝集，O多价血清凝集；再依次用单因子血清做凝集试验，O抗原确定后，再用H因子血清凝集。
2 结果与讨论
2.1 结果
2.1.1 菌落形态
在血平板、MC平板上可见中等大小、无色半透明、表面光滑的菌落，菌落边缘整齐。在SS琼脂培养基平板上可见中等大小、无色半透明、中心黑褐色、表面光滑的菌落，菌落边缘整齐。为革兰氏阴性短杆菌。
2.1.2 生化结果
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TSI反应结果：斜面不产酸，底层产酸，并产生气体，三糖铁琼脂中间变黑色即产生硫化氢。
生化鉴定：硫化氢+，靛基质-，pH7.2尿素-，氰化钾-，赖氨酸脱羧酶+，赖氨酸+，乌氨酸+，ONPG-，水杨苷-，棉子糖-，动力+。
2.1.3 血清凝集反应
O1、O4单价血清凝集；H抗原第1相i因子凝集，H抗原第2相1,2因子凝集。
2.1.4结果报告
通过菌落形态、革兰氏染色、生化试验、血清玻片凝集试验可以判断此患者感染为鼠伤寒沙门氏菌。
2.2 讨论
2.2.1 医院临床报告患者为伤寒，实验室诊断血清分型时，当多价血清凝集后，伤寒沙门氏菌血清因子未发生凝集现象，又重新对血清因子进行筛查，经过反复多次血清凝集试验，确定此患者为鼠伤寒沙门氏菌感染。
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2.2.2 通过核查该病人粪便微生物培养记录，发现他们报告的结果为鼠伤寒沙门氏菌，两家实验室检测结果一致，进一步调查发现，由于医院临床医生的疏忽，将鼠伤寒沙门氏菌误报为伤寒沙门氏菌。
2.2.3临床医生的误报，可能影响患者的治愈过程。孝昌县为省级伤寒监测点，09年底曾经暴发过伤寒流行，这种误报可能会引发一系列的应急响应机制。
参考文献：
[1] 李碧华.伤寒菌苗研究现状[J].中国公共卫生杂志，1981；7(1)：35.
[2] WS 280-2008《伤寒和副伤寒诊断标准》.
[3] GB 4789.4-2010《食品安全国家标准-沙门氏菌检验》.
作者简介：
裴银凤,主管技师,孝昌县疾病预防控制中心, 百拇医药