提高中期染色体分散方法的研究(2)
由上可知，中期染色体的扩散主要是在固定液干燥的过程中完成的。因此，若想提高染色体的分散度，从理论上来讲，我们可以通过减慢固定液的挥发速度，延长固定液挥发的时间，得到分散良好的中期分裂相。固定液挥发过快时，染色体分散不开，交叠在一起，对核型分析不利。固定液挥发速度合适时，能够得到分散良好的中期染色体，染色体重叠数少，断裂数少，缺失数少。固定液挥发过慢时，染色体容易断裂，卷曲，缺失，虽然分散面积较大，但是同样不利于染色体核型分析。环境中的相对湿度[5]，影响着固定液的挥发速度。当温度不变时，相对湿度越高，固定液挥发越慢，理论上染色体的分散度就越大；相对湿度越低，固定液挥发越快，染色体的分散度就越小。
Jack L. Spurbeck等为探讨环境相对湿度和温度对染色体分散的影响，以2250例羊水细胞和1650例淋巴细胞为材料，通过实验设计控制环境的相对湿度和温度，分析数据后得出：无论是原位还是非原位培养体系，干燥后的中期染色体的分散面积是相对湿度和温度的相互作用的结果。当相对湿度和温度升高时，在到达一个阈值之前，中期分裂相的面积也随之增大。通过不同的温度和相对湿度的组合，可以得到完美的中期分裂相。在他们看来，采用环境控制系统来控制相对湿度和温度是获得最佳染色体分裂相的实用和稳定的手段。
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由此可见，相对湿度和温度的升高可以增加染色体的分散程度，其中相对湿度是染色体分散程度的主要影响因素，但随着相对湿度和温度的升高，染色体断裂的比率增加，染色体的质量降低。因此适当的相对湿度和温度对于高质量的染色体制备非常重要。
综上，本文主要总结了低渗时间，固定液比例，预固定液剂量，环境的相对湿度和温度对中期染色体分散的影响。但是，还有一些因素前文并未涉及，如滴片高度，滴片时悬液的浓度，滴片时载玻片的角度等等。我们想要稳定的得到分散良好的中期染色体，可以通过控制主要因素，如环境的相对湿度和温度，从而得到分散良好的中期染色体。基于这种观点，一种封闭的能够提供恒定的相对湿度和温度的染色体分散仪应运而生。这种仪器通过温度、相对湿度和气流的双向调节，能够稳定的得到分散良好的染色体分裂相，提高染色体分析的分辨率和诊断结果的准确性。但是这种仪器在国内还远没有达到普及的程度，绝大多数实验室还必须手工的控制这些因素。希望本文能够为实验室一线工作者提供一些参考。
参考文献：
, 百拇医药
[1] 桂俊豪等，Carnoy’s 预固定剂量对中期染色体分散度的影响[J].Int J Genet. 2006，Vol 29：416-419
[2] Wen Deng， A new method for improving metaphase chromosome spreading.Cytometry Part A 2003；51A：46-51.
[3] Jack L.， Dynamics of chromosome spreading. American Journal of Medical Genetics 1996；61：387-393.
[4] Octavian Henegariu， Improvements in cytogenetic slide preparation： controlled chromosome spreading， chemical aging and gradual denaturing. Cytometry 2001； 43：101-109.
[5]Claussen U， Demystifying chromosome preparation and the implications for the concept of chromosome condensation during mitosis. Cytogenetic and Genome Research 2002；98：136-146.
作者简介：
梁 娜(1977—)女，山西人，主管检验师，主要从事中孕期唐氏综合征产前筛查和人类染色体检查研究, 百拇医药(梁娜)
Jack L. Spurbeck等为探讨环境相对湿度和温度对染色体分散的影响，以2250例羊水细胞和1650例淋巴细胞为材料，通过实验设计控制环境的相对湿度和温度，分析数据后得出：无论是原位还是非原位培养体系，干燥后的中期染色体的分散面积是相对湿度和温度的相互作用的结果。当相对湿度和温度升高时，在到达一个阈值之前，中期分裂相的面积也随之增大。通过不同的温度和相对湿度的组合，可以得到完美的中期分裂相。在他们看来，采用环境控制系统来控制相对湿度和温度是获得最佳染色体分裂相的实用和稳定的手段。
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由此可见，相对湿度和温度的升高可以增加染色体的分散程度，其中相对湿度是染色体分散程度的主要影响因素，但随着相对湿度和温度的升高，染色体断裂的比率增加，染色体的质量降低。因此适当的相对湿度和温度对于高质量的染色体制备非常重要。
综上，本文主要总结了低渗时间，固定液比例，预固定液剂量，环境的相对湿度和温度对中期染色体分散的影响。但是，还有一些因素前文并未涉及，如滴片高度，滴片时悬液的浓度，滴片时载玻片的角度等等。我们想要稳定的得到分散良好的中期染色体，可以通过控制主要因素，如环境的相对湿度和温度，从而得到分散良好的中期染色体。基于这种观点，一种封闭的能够提供恒定的相对湿度和温度的染色体分散仪应运而生。这种仪器通过温度、相对湿度和气流的双向调节，能够稳定的得到分散良好的染色体分裂相，提高染色体分析的分辨率和诊断结果的准确性。但是这种仪器在国内还远没有达到普及的程度，绝大多数实验室还必须手工的控制这些因素。希望本文能够为实验室一线工作者提供一些参考。
参考文献：
, 百拇医药
[1] 桂俊豪等，Carnoy’s 预固定剂量对中期染色体分散度的影响[J].Int J Genet. 2006，Vol 29：416-419
[2] Wen Deng， A new method for improving metaphase chromosome spreading.Cytometry Part A 2003；51A：46-51.
[3] Jack L.， Dynamics of chromosome spreading. American Journal of Medical Genetics 1996；61：387-393.
[4] Octavian Henegariu， Improvements in cytogenetic slide preparation： controlled chromosome spreading， chemical aging and gradual denaturing. Cytometry 2001； 43：101-109.
[5]Claussen U， Demystifying chromosome preparation and the implications for the concept of chromosome condensation during mitosis. Cytogenetic and Genome Research 2002；98：136-146.
作者简介：
梁 娜(1977—)女，山西人，主管检验师，主要从事中孕期唐氏综合征产前筛查和人类染色体检查研究, 百拇医药(梁娜)