人胚胎干细胞生物学特征及成骨诱导分化相关研究(1)
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【摘 要】目的:研究体外培养人胚胎干细胞的生物学特征,初步探讨人胚胎干细胞向成骨细胞定向分化的特性,为后续成骨细胞移植治疗研究提供很好的资源。方法:体外传代培养人胚胎干细胞,显微镜观察细胞的贴壁生长情况,细胞染色体检查确认核型,免疫荧光染色检测人胚胎干细胞的异性和细胞周期,进行成骨诱导分化及碱性磷酸酶染色和茜素红染色鉴定。结果:人胚胎干细胞在体外培养体系中增殖迅速,核型检测为46,XX,免疫荧光染色检测细胞表达人胚胎干细胞特异性标志,细胞周期检测结果显示细胞的增殖能力强,大部分细胞处于 G1期。人胚胎干细胞经成骨诱导分化后,碱性磷酸酶染色和茜素红染色阳性。结论:在特殊培养条件下,人胚胎干细胞在体外能维持其多能特性,体外可以诱导分化成为骨细胞,有望促进应用于骨组织工程移植治疗的机制探讨。
【关键词】人胚胎干细胞;生物学特性;成骨诱导分化
【中图分类号】R329 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)02-0059-03
人胚胎干细胞(human embryonic stem cell, hESC)由内细胞团(inner cell mass, ICM)分离培养而得,其在体外能保持多能特性和向各个胚层细胞分化的潜能[1],并能诱导分化为特定方向的细胞和组织,这在基因治疗、组织工程学、药学研究等众多领域具有广泛的应用价值[2]。在hESC的建系过程中,研究人员不断寻找分离获取各种ES细胞的最佳时期;探讨ES细胞的高效增殖和有效抑制其分化,但是在这过程中很容易出现非整倍体核型。目前很多研究利用工程化组织进行骨缺损治疗,将分离获得的间充质干细胞在体外用特定的培养条件在体外扩增 ......
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