雌二醇及其受体抑制剂对人卵巢癌SKOV3细胞体外生长的影响(2)
第1页 |
参见附件。
2. 药物
雌二醇(E2)及其受体抑制剂氟维司群(ICI 182 780):美国sigma公司,分子量分别为272.39、606.77,无水乙醇配成0.001 mol/L原液,E2在4℃保存,ICI 182 780常温保存备用。
(三)实验用细胞系
卵巢癌细胞株SKOV3来自人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞,购于南京凯基公司,大连医科大学附属第一医院中心实验室传代培养。
(四)实验用液的制备:
PBS液:(0.1M,PH7.2-7.4):PBS粉置于大烧杯,加三蒸水,玻璃棒搅拌均匀,定容至1000ml。调整PH值为7.4后分装至玻璃瓶封口,置高压锅中高压灭菌。灭菌后的PBS液置-4℃冰箱中备用,1月内有效。
MTT溶液的制备(5mg/mL):称取250mgMTT粉放入小烧杯中,加入40ml已配好的PBS液,搅拌均匀,补足PBS液至50ml,超净台中用0.22um的微孔滤器灭菌,分装。避光-20℃冰箱保存1个月有效。
胰酶的制备(0.25%):GIBCO公司,称取胰酶粉末0.25g,用PBS液100ml充分溶解,超净台中用0.22um的微孔滤器灭菌,4℃冰箱保存备用。
台盼蓝染液(0.4%):称取固体台盼蓝(Trypan blue)0.4g,溶于PBS液100ml,过滤固体杂质,封存备用。
二、方法
(一)细胞培养与传代
1.细胞培养
将卵巢癌细胞株SKOV3于DMEM培养液(含10%胎牛血清、1.5mmol/L谷氨酰胺、青链霉素各100IU/ml ......
您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件。