C6/36细胞中浓核病毒的提取和检测
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【摘 要】目的:通过对实验室培养的C6/36细胞中的浓核病毒的提取,检测浓核病毒是否存在并研究其与蚊媒病毒所感染细胞的关系。方法:通过对正常C6/36细胞、疑似潜伏浓核病毒细胞、未感染病毒且出现CPE细胞、蚊媒病毒感染C6/36细胞进行浓核病毒DNA提取和检测,使用特异性引物扩增后测序比对,证明浓核病毒的存在。结果:成功的从样本中提取出浓核病毒DNA 结论:浓核病毒在C6/36细胞中广泛存在并且在受到病毒感染时会大量增殖。同时可能引起C6/36细胞对病毒敏感性降低,利用这一特性可以利用浓核病毒对蚊媒以及蚊媒病毒进行生物防治。
【关键词】C6/36细胞;浓核病毒;蚊媒病毒;生物防治。
【中图分类号】R373 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484(2013)04-0178-02
白纹伊蚊细胞(C6/36)是实验室中增殖蚊媒病毒的常用细胞,常首先通过观察CPE来评价病毒增殖情况。但有时会出现接种病毒的细胞样本CPE不明显、同种细胞CPE不同、虽有CPE出现但病毒含量检测结果显示病毒增殖受到抑制等情况。有报道C6/36细胞中可能潜伏伊蚊浓核病毒(Densonucleosis virus,DNV)[1] 这种单链DNA病毒在宿主细胞未被登革热病毒感染时,往往不影响细胞的正常生长与传代。当细胞受到登革热病毒感染时,这种病毒则大量繁殖,从而引起宿主细胞的变化甚至死亡同时抑制其他病毒的增殖。
本实验室在利用C6/36细胞对病毒进行培养时,观察到接种病毒的C6/36细胞发生明显CPE但几乎无法检测到病毒并且同为黄病属的病毒引起CPE不尽相同,在证实其未污染或被其他病毒感染后 ......
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