HPV18型病毒绝对定量检测方法的建立(1)
HPV18型病毒绝对定量检测方法的建立,人乳头瘤病毒18,宫颈刮片,病毒绝对含量,荧光定量PCR法
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【摘 要】目的：利用实时荧光定量PCR法建立灵敏而稳定的人乳头瘤病毒 (human papillomavirus， HPV) 18型病毒含量的检测方法。方法：收集就诊于焦作市妇幼保健院的妇科门诊宫颈刮片脱落细胞50例；采用普通PCR扩增HPV18 E6/7基因，将PCR产物纯化，连接入T载体，构建HPV18 E6/7基因定量PCR扩增的标准品，采用实时荧光定量PCR以检测扩增效率和相关系数。结果：构建含有HPV18 E6/7片段的T载体作为检测HPV18的病毒含量标准品条件良好，标准曲线的相关系数分别为0.9814，相关性检验P<0.05。结论：采用荧光定量PCR法所建立的HPV18型病毒含量的检测方法具有灵敏性和稳定性，可以为临床宫颈患者HPV18型的定量检测提供一种有效的方法。
【关键词】人乳头瘤病毒18；宫颈刮片；病毒绝对含量；荧光定量PCR法
【中图分类号】R737.33 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)05-0210-02
前言：
宫颈癌作为最常见的妇科下生殖道恶性肿瘤，其新发病例约13. 5 万，且发病年龄有年轻化趋势[1]。持续性高危型人乳头瘤病毒(human papilloma vires，HPV) 感染是宫颈癌发生的首要因素。高危型HPV18病毒感染在我国以及世界范围内HPV各型别中的感染率占前三位，其病毒含量与宫颈病变有一定的相关性[2，3]，但HPV18型病毒含量的临床应用范围不是很普及。本文旨在通过敏感而稳定的荧光实时定量PCR技术，建立HPV18型定量检测方法，为我们临床医院宫颈疾病中HPV18的定量检测提供一种可靠的方法 ......
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