三聚氰胺胶体金免疫层析检测技术的研究(1)
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【摘 要】目的：建立一种准确、快速、简便的检测三聚氰胺(MEL)的胶体金免疫层析检测技术。方法：采用柠檬酸三钠还原法制备一定粒径的胶体金溶液，并标记抗MEL单克隆抗体，将一定浓度的包被抗原(MEL-OVA)及羊抗鼠二抗IgG喷在硝酸纤维素膜上，制备胶体金免疫层析试纸条。结果：该试纸条检测阈值可达500 ng/mL，检测的准确性为97.2%，试纸条的稳定性和重复性良好。结论：采用该试纸条检测三聚氰胺特异性强，灵敏度高，而且简便快速，无需特殊仪器设备，在液态乳制品质量筛查工作中应用价值较大。
【关键词】三聚氰胺；单克隆抗体；胶体金；试纸条
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)06-0140-03
近年来三聚氰胺(melamine)在我国乳制品中非法添加的情况时有发生，引起了政府部门及社会各界的广泛关注。三聚氰胺是一种含氮杂环有机化合物[1]，是重要的氮杂环有机化工原料，主要用于工业生产中。后常被不法商人用作食品添加剂，以冒充食品中的蛋白质，被称为“蛋白精”。由于乳制品中的蛋白质主要由氨基酸组成，其含氮量一般不超过30%，平均含氮量为16%，每100g牛奶中添加0.1g三聚氰胺，就能提高0.4%蛋白质。食品中蛋白质测试方法常采用凯氏定氮法测定总氮来估算蛋白质含量[2]。这种方法只能知道氮的总量，不能识别氮的来源和氮源的种类，这就为三聚氰胺的非法添加提高了可乘之机。
目前，三聚氰胺及其代谢物的分析检测主要依赖仪器联用技术[3-5]，关于三聚氰胺的免疫学检测方法也有了部分相关报道[6-8]。本文采用前文制备的三聚氰胺完全抗原(MEL-BSA)及单克隆抗体 ......
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