三维细胞培养技术在流感病毒监测中的应用研究(2)
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2.2细胞生长效率比较：75mL细胞瓶狗肾细胞(MDCK)工作容量为10mL，细胞总数为2*106个。传统贴壁细胞培养传代一次可以得到9瓶25mL细胞瓶的狗肾细胞用于病毒培养，其工作容量约为18毫升单位细胞数2.5*105个/mL，得到的细胞总数约为4.5*106个。利用三维细胞培养技术计数培养后可以得到4瓶40mL细胞悬液。用细胞计数板5次，结果见表一。 计算公式：总细胞数=单格细胞计数*104*160/ml。
2.3 接种中毒后血凝效价比较：用9份甲型流感病毒病毒核酸阳性标本，采样液染毒后血凝效价测定结果见表二，A组为单层细胞贴壁培养中毒，B组为三维细胞培养后中毒实验。
以上结果用几何均数配对T检验统计分析，结果P > |t| = 0.5943，显示三维培养传代细胞的染毒实验滴度与贴壁细胞培养的细胞中毒后血凝试验效价结果无显著性差异。
2.4 甲型流感病毒细胞培养后核酸检测结果比较：将9例经直接检测甲型流感核酸阳性标本分别接种三维培养和贴壁培养的MDCK细胞，CO2培养，观察中毒后，重新抽核酸进行核酸分型检测，均为H3型季节性流感。结果见表三。A组为单层细胞贴壁培养中毒液检测，B组为三维细胞培养后中毒液检测。
以上结果用配对T检验统计分析，结果P > |t| = 0 ......
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