5.4 实时荧光定量PCR技术 实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR)是一种既能定性检测病原体核酸，又能对细菌和病毒载量进行定量分析的方法。常用探针有Taqman探针、分子灯塔探针(molecular beacons)和FRET探针。Mateu Espasa报道应用TaqMan探针方法检测结核杆菌利福平和异烟肼耐药性，特异性为100%，灵敏性为74.3%。HIYAM用分子灯塔探针方法检测耐利福平结核菌，结果在65例药敏实验阳性样本中检出63例，而11例临床耐药标本检测结果全部为阳性。FRET探针也是实时荧光定量PCR技术的常用探针，通过对熔解曲线进行分析来检测耐药结核杆菌。

    5.7 Xpert MTB/RIF检测方法：它是由美国Cepheid公司开发出的一种能在2 小时内直接从病人新鲜痰液中快速准确诊断结核分枝杆菌及利福平药敏试验方法。该方法基于荧光定量 PCR 的原理，采用半巢式荧光定量 PCR的技术，根据结核分支杆菌对利福平产生耐药性的ropB基因的81bp的核心区设计5条探针，使用六重定量 PCR对痰液中的结核分支杆菌进行检测 ......