大鼠大脑皮层星形胶质细胞不同体外培养方法对GFAP表达的影响(2)
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参见附件。
1.2.4 细胞GFAP表达的检测 接种24h后，4%多聚甲醛固定，洗涤；加入封闭液封闭60 min，洗涤3次，每次5 min；用稀释50倍兔抗人GFAP一抗作用60 min，洗涤加入稀释500倍Cy3标记的IgG二抗，避光作用60 min，洗涤(同上)；滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片。在荧光显微镜下(200倍)，每个标本随机取3个视野，用图像采集处理系统记录每个视野的荧光强度值，以平均荧光强度值表示该标本的GFAP表达相对水平。
1.3统计学方法 应用SAS8.1统计软件进行数据分析，计量资料实验数据采用均数±标准差( )表示。两变量采用t检验，P <0.05认为差异有统计学意义。
2结果
传代后，星形胶质细胞胞体较大而扁，形状不规则，胞质较丰富，细胞核圆形或卵圆形，常偏于胞体的一侧，内有1～2个核仁，经GFAP特异性标记抗体的免疫荧光染色以及DAPI染色后，荧光显微镜观察可见：两种培养方法特异性染色的GFAP亮度不同，但统计分析示：GFAP阳性细胞率震荡纯化为(98.3±0.9)%、传代纯化为(97.0±1.1)%(P > 0.05)，(见图1，图2)。提示不同的培养方法对Ast的纯化没有影响。
3讨论
在中枢神经系统中，胶质细胞是主要的组成部分，其中星形胶质细胞(Ast)在中枢神经系统中发挥着多种作用。在受到一定程度的刺激时，星形胶质细胞会表现出胞体变大，突触变长，交织成网的“反应性星形胶质细胞”的形态特征 ......
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