甲硝唑片含量测定测量不确定度分析与评定
【摘要】目的：建立甲硝唑片含量测定测量不确定度分析与评定模型。方法：分析甲硝唑片含量测定过程中样品称量、供试液稀释、高效液相色谱法测量等因素对含量测定不确定度的影响，给出扩展测量不确定度报告。结果：扩展不确定度U95=1.0%，覆盖因子k=2。结论：分析产生不确定度的主要来源，为进一步提高含量测定方法的准确性提供可靠理论依据。
【关键词】甲硝唑片;含量测定;不确定度
【中图分类号】R715 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2019)10-0065-02
1测量仪器、试剂和样品
1.1测量仪器：高效液相色谱仪：LC-2040C 3D，日本岛津公司，峰面积测量重复性限为0.2%。
电子天平：XS205DU型，梅特勒-托利多公司，最大量程Max=81g，实际分度值d=0.01mg，检定分度值e=0.1mg，10mg-5g量程最大允许误差MPEV=0.02mg;最大量程Max=220g，实际分度值d=0.1mg，检定分度值e=1mg，10mg-50g量程最大允许误差MPEV=0.2mg。
單标线容量瓶：50mL(A级)，100mL(A级);
单标线吸量管：5mL(A级)。
1.2试剂：甲硝唑标准品(中国食品药品检定研究院，批号：100191-200606/1805，规格：约100mg，99.9%);甲醇为色谱纯，水为超纯水。
1.3样品：甲硝唑片(A公司生产，批号：190602，规格为0.2g/片)。
2.测量方法
2.1对照品溶液的制备
取甲硝唑对照品约12.5mg( )，精密称定，置50mL( )量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
2.2供试品溶液的制备
取甲硝唑片20片，精密称定(计算平均片重 为0.2736g/片)研细，精密称取约0.34g(m1)(约相当于甲硝唑25mg)，置50mL(V50)量瓶中，加50%甲醇适量，振摇使甲硝唑溶解，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL(V5)，置100mL(V100)量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。
2.3样品含量测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液注入液相色谱仪【色谱条件：色谱柱选择C18柱(4.6mm×150mm，5μm)，流动相为甲醇：水(20：80)，检测波长320nm，流速1mL/min，进样量10μl测定，即得对照品(A0)和供试品峰面积(A1)。
2.4结果计算：根据外标法按下式计算，对照品溶液重复进样五次，供试品溶液两份平行试样分别进样两次，分别测量及计算后取平均值为测得值。结果甲硝唑平均含量为99.5%。
3建立测量数学模型
考虑到被测量的重复性影响不可忽略，加入重复性影响后，被测量按下式计算：X′=X+XR
式中：X′——加入重复性影响后甲硝唑的含量，%;
X——甲硝唑片中甲硝唑的含量，%;
XR——甲硝唑含量的重复性影响量(其值为零，不确定度非零)，%;
其中：
式中：c对——对照品溶液中甲硝唑的浓度，g/mL;
A供——供试品的峰面积;
C样——对照品的峰面积;
C样——样品浓度，g/mL;
w(—)——平均片重，本例为0.2736g/片;
W样标量——标示量，本例为0.2g/片。
4合成标准不确定度
5 评定
取10份样品进行重复性测定，测量数据见表2：
7扩展不确定度
取包含因子k=2，则扩展不确定度为：U=k =2×0.493%≈1.0%
8 报告及分析
本次甲硝唑片中含量为标示量的检测结果为：(99.5±1.0)%，k=2。从不确定度贡献量来看，供试样浓度、仪器重复性、供试样测定次数无明显差异，说明这三个因素都是影响含量测定的主要因素。
参考文献
[1] 陈玮;苏克剑;孙黎;;HPLC法测定阿莫西林含量的测量不确定度评估[J];中国药房;2011年20期
[2] 秦立;肖英;陈诗慧;范亚刚;;HPLC法测定枸橼酸喷托维林片含量的测量不确定度评定[J];中国药师;2014年03期
作者简介：万芳友(1966.04)男 山东莒南县 汉 大学本科 主任药师 日照市市场监管检验检测中心 研究方向：药品检验。李爱华(1976.04)女 山东五莲县 汉 大学本科 副主任药师 日照市市场监管检验检测中心 研究方向：药品检验。, 百拇医药(万芳友 李爱华)
【关键词】甲硝唑片;含量测定;不确定度
【中图分类号】R715 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2019)10-0065-02
1测量仪器、试剂和样品
1.1测量仪器：高效液相色谱仪：LC-2040C 3D，日本岛津公司，峰面积测量重复性限为0.2%。
电子天平：XS205DU型，梅特勒-托利多公司，最大量程Max=81g，实际分度值d=0.01mg，检定分度值e=0.1mg，10mg-5g量程最大允许误差MPEV=0.02mg;最大量程Max=220g，实际分度值d=0.1mg，检定分度值e=1mg，10mg-50g量程最大允许误差MPEV=0.2mg。
單标线容量瓶：50mL(A级)，100mL(A级);
单标线吸量管：5mL(A级)。
1.2试剂：甲硝唑标准品(中国食品药品检定研究院，批号：100191-200606/1805，规格：约100mg，99.9%);甲醇为色谱纯，水为超纯水。
1.3样品：甲硝唑片(A公司生产，批号：190602，规格为0.2g/片)。
2.测量方法
2.1对照品溶液的制备
取甲硝唑对照品约12.5mg( )，精密称定，置50mL( )量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
2.2供试品溶液的制备
取甲硝唑片20片，精密称定(计算平均片重 为0.2736g/片)研细，精密称取约0.34g(m1)(约相当于甲硝唑25mg)，置50mL(V50)量瓶中，加50%甲醇适量，振摇使甲硝唑溶解，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL(V5)，置100mL(V100)量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。
2.3样品含量测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液注入液相色谱仪【色谱条件：色谱柱选择C18柱(4.6mm×150mm，5μm)，流动相为甲醇：水(20：80)，检测波长320nm，流速1mL/min，进样量10μl测定，即得对照品(A0)和供试品峰面积(A1)。
2.4结果计算：根据外标法按下式计算，对照品溶液重复进样五次，供试品溶液两份平行试样分别进样两次，分别测量及计算后取平均值为测得值。结果甲硝唑平均含量为99.5%。
3建立测量数学模型
考虑到被测量的重复性影响不可忽略，加入重复性影响后，被测量按下式计算：X′=X+XR
式中：X′——加入重复性影响后甲硝唑的含量，%;
X——甲硝唑片中甲硝唑的含量，%;
XR——甲硝唑含量的重复性影响量(其值为零，不确定度非零)，%;
其中：
式中：c对——对照品溶液中甲硝唑的浓度，g/mL;
A供——供试品的峰面积;
C样——对照品的峰面积;
C样——样品浓度，g/mL;
w(—)——平均片重，本例为0.2736g/片;
W样标量——标示量，本例为0.2g/片。
4合成标准不确定度
5 评定
取10份样品进行重复性测定，测量数据见表2：
7扩展不确定度
取包含因子k=2，则扩展不确定度为：U=k =2×0.493%≈1.0%
8 报告及分析
本次甲硝唑片中含量为标示量的检测结果为：(99.5±1.0)%，k=2。从不确定度贡献量来看，供试样浓度、仪器重复性、供试样测定次数无明显差异，说明这三个因素都是影响含量测定的主要因素。
参考文献
[1] 陈玮;苏克剑;孙黎;;HPLC法测定阿莫西林含量的测量不确定度评估[J];中国药房;2011年20期
[2] 秦立;肖英;陈诗慧;范亚刚;;HPLC法测定枸橼酸喷托维林片含量的测量不确定度评定[J];中国药师;2014年03期
作者简介：万芳友(1966.04)男 山东莒南县 汉 大学本科 主任药师 日照市市场监管检验检测中心 研究方向：药品检验。李爱华(1976.04)女 山东五莲县 汉 大学本科 副主任药师 日照市市场监管检验检测中心 研究方向：药品检验。, 百拇医药(万芳友 李爱华)