采用高效液相色谱法测定金银花中绿原酸含量方法探讨(2)
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目前,金银花中绿原酸的提取方法主要有水提、醇提、薄层分析柱层析等,从经济、适用及安全各方面考虑,本文中用到的醇提方法提取率高,且提取过程中能有效的排除其他水溶性物质成分的干扰,减少绿原酸损失率,为一种高效的提取方法[4]。
随着科技的发展,对小分子功能成分的检测技术及分析技术得到了很大提高,绿原酸的检测从最初只能定性的定量法、比色法、分光光度计法等发展为不仅能够定性还能准确定量的高效液相色谱法。本文所用到的高效液相色谱法,不仅具有操作简单、技术成熟等特点,还有对其目标成分检测的回收率高、精密度高、重现性好等优点。
本文研究了高效液相色谱法分析测定金银花中绿原酸含量,我们采用50%甲醇,选用KQ-500B超声仪,在功率250W,频率35kHz下超声处理30分钟,提取金银花中绿原酸。通过紫外分光光度计扫描绿原酸标准溶液,发现其在327nm处具有最大吸收值,因此确定HPLC检测波长,并建立高效液相色谱条件,色谱柱采用C18柱,流动相为乙腈:0.4%磷酸溶液(13∶87),流速为1ml/min,进样量为10μl,柱温在30℃,检测波长为327nm,在此色谱条件下能有效的检测到绿原酸,样品保留时间在7min,绿原酸与邻近成分分离效果良好。并在0、1、2、5、10、20小时时分别测定样品的含量,平均峰值31054.5,标准偏差0.04%,表明稳定性良好。
目前,市场上金银花品种众多,然而其质量、品质差异巨大,甚至一些不良商家采用违法手段,如硫磺熏制,以改善花色品质,然而其功效成分绿原酸含量很低。本文旨在建立完善的绿原酸提取、检测方法,准确测定金银花中绿原酸的含量,监督、控制金银花品质质量,为人们高效利用金银花提供了一定的参考价值。
参考文献
[1] 聂凌鸿,岳淼.金银花中绿原酸提取工艺的优化[J].食品研究与开发,2008,29(1):51-55.
[2] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(第一部)[M].化学工业出版社,2000,177.
[3] 周荣汉主编.中药资源学[M].北京:中国医药科技出版社,1993:426-433,179,85.
[4] 刘恩蕊,李青山.高效液相色谱法测定金银花有效部位中绿原酸的含量[J].山西医科大学学报,2006,37(2):166-168.
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