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编号:11505816
定量酶联免疫吸附试验在检测风疹IgG抗体中的应用
http://www.100md.com 2007年10月1日 《上海预防医学》 2007年第10期
定量酶联免疫吸附试验在检测风疹IgG抗体中的应用
定量酶联免疫吸附试验在检测风疹IgG抗体中的应用

     1995—2005年,上海市每年报告风疹病例100例左右,发病率控制在1/10万以下。上海市最近一次大流行在1993年,全市共报告病例58 104例,报告发病率达451.57/10万。实验室风疹检测是风疹监测工作的重要组成部分,疑似病例的最后实验室确诊对风疹疫情的预警发挥重要作用。 

    酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测风疹IgG抗体最常用的实验室血清学检测方法,传统的ELISA通过血清稀释将阳性血清标本的抗体含量划分为20 IU/mL为阳性。定量:首先用阳性对照平均值与阳性对照参考值求F因子,所有血清标本OD值乘以F因子后,利用试剂盒附送的质量控制评估表和标准曲线求血清中的抗体国际单位值。

    1.3.2半定量检测定性:抗体滴度2 =388.68,P=0.00 ),说明两种方法的结果存在高度关联。两种方法差别比较,经统计学检验差异无统计学意义,χ2=2.55,P>0.05。说明两种方法在检测风疹抗体阳性检出率相同(表1)。
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    2.3两种检测方法结果定量比较(相关性分析)

    随着抗体滴度值的增高,病毒量结果的几何平均滴度也随着相应的增高(表2)。对两种检测方法结果进行相关分析,得出Spearman等级相关系数(rs)为0.685,n=889,P=0.000,说明两种方法的检测结果呈高度正相关。

    3讨论

    风疹实验室检测是风疹监测工作的重要组成部分,但风疹病毒的分离与检测技术存在一定难度 。在定量检测方面,半定量检测抗体滴度分组与定量检测抗体含量IU呈明显正相关。从定量检测抗体含量IU值95%正常值可信区间较小,抗体IU值检测的精度较高。定量的抗体IU值检测,在定性判断结果方面,增加了一个灰度区域,即IU值位于10~20IU/ mL,从表2看,IU值的灰区也即是相当于滴度为1∶20,传统方法界定为阳性值。灰区的存在,相对于传统ELISA方法,在抗体阳性检出率方面增加了定量试验的准确度及可靠性,更有助于准确地了解健康人群中风疹的免疫水平及抗体阳性水平。
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    另外,定量ELISA还具有操作简便的特征。德国维润试剂中带有1张已经做好的标准曲线图,还拥有相应的软件,在保证抗体浓度定量的准确性前提下,从已校正的被测标本OD值方便准确地得到相应的抗体IU水平。

    本次研究可以看出,商品化的定量ELISA方法操作简便,具有良好的精度及准确性,能方便准确地评价人群血清中风疹的抗体水平及风疹病毒抗体阳性情况,在风疹病毒的血清学研究中具有一定的优势。对于该方法的可重复性及人群中应用的具体情况还有待进一步的研究。

    4参考文献

    [1]毛乃颖,蒋小泓 ,吴立萍,等.定量酶联免疫吸附试验在检测麻疹IgG抗体中的应用与比较[J].中国计划免疫,2005,6(11):187-189.

    [2]Malley R,Vernacchio L,Dcvincenzo J,et a1.Enzyme-linked immunosorbent assay to assess respiratory syncytial virus concentration and correlate results with inflammatory mediators in tracheal secrations[J].The Pediatric Infectious Disease Journal,2000,19(1):1-7.

    [3]候林蒲,姜英涛,牛向兰.间接酶联免疫定量检测风疹IgG 的方法学研究[J].中国生育健康杂志,2003,14(2):116 118.

    (收稿日期:2007-04-03), 百拇医药(汤素文 沈 洁 瞿伟萍 胡家瑜 施 燕 张金芳)