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编号:11671333
用麻疹活疫苗制备抗麻疹病毒单克隆抗体及其应用(2)
http://www.100md.com 2008年8月1日 《上海预防医学》 2008年第8期
     1.2.3 抗MV-酶结合物的制备 以辣根过氧化物酶标记纯化的自行制备的抗MV-单克隆抗体IgG。

    1.2.4 ELISA检测抗MV-IgM试剂盒的制备 以本室自制的抗MV -酶结合物和经灭活的MV疫苗细胞培养抗原,分别作为捕获法ELISA法实验中的酶结合物和抗原,再经实验对试剂盒中其他组分的参数进行调整。

    1.2.5 血清抗MV-IgM检测 ①自制试剂盒:以1∶100稀释的上述临床疑似麻疹血清标本50 μL,加入包被抗μ链的微孔板孔内,同批分别设置阴、阳性和空白对照孔。37℃温育1 h,洗板,加入用MV和抗MV-酶结合物制备的免疫复合物,各孔50 μL。37℃孵育1 h,再次洗板,加入四甲基联苯胺(TMB)底物显色,再经37℃温育10 min,加浓度为2 N的硫酸终止液终止反应后,用酶标仪读取A值。结果判定:S(样品)A值/ 临 界 值(cutoff)≥1判为阳性。其中临 界 值=阴性对照平均A值×2.1(阴性对照平均A值

    ①为两次检测结果的均值;S/CO值为S(样品)A值/ 临 界 值(cutoff) ......
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