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编号:13060787
肉制品中沙门氏菌荧光定量PCR标准质粒的构建(1)
http://www.100md.com 2017年4月1日 《上海预防医学》 2017年第4期
     摘要:目的 制备用于检测肉制品中沙门氏菌荧光定量PCR的标准质粒。方法 设计针对沙门氏菌invA基因的引物,扩增特异片段,转入质粒载体中构建重组质粒。将构建的重组质粒作为标准品,进行优化后的实时荧光定量PCR,建立标准曲线,并考察该标准品灵敏性及稳定性。结果 成功构建含有沙门氏菌invA基因的质粒标准品,用其建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板的拷贝数呈良好线性关系(r2=0.9979),最低可以检出10 拷贝/反应。该标准质粒经验证具有良好的稳定性。用该质粒标准品检测肉制品中的沙门氏菌,经2h增菌后,可在7h内完成对样本的检测。结论 所构建的质粒标准品可用于荧光定量PCR检测肉制品中的沙门氏菌,为考量实验质量提供参考依据。

    关键词:质粒标准品;荧光定量PCR;沙门氏菌;肉制品;

    当前,微生物污染引起的食源性疾病已引发人们的普遍关注和深入研究。在各类食源性病原菌及危害因子中,沙门氏菌是主要致病因子[1]。根据我国统计数据显示 ......
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