2.5气管滴注致大鼠血液中炎症因子及氧化应激指标变化的影响> 积分波微磁场对PM2.5气管滴(1)
摘要：目的 观察积分波微磁场对大气PM2.5混悬液气管滴注引起的大鼠血液中炎症及氧化应激变化的影响。方法健康成年雄性SD大鼠以每组6只随机分为6组。空白组不做任何处理；生理盐水对照组仅气管滴注生理盐水；PM2.5暴露组仅气管滴注PM2.5混悬液40 mg/kg；积分波微磁场干预组先进行PM2.5混悬液气管滴注，后积分波微磁场治疗仪分别以每天3次、5次的频率进行干预；积分波微磁场干预对照组仅以每天5次的频率进行处理。末次处理24 h后，收集大鼠血清，测定血清中的肿瘤坏死因子-d(TNF-α)、白细胞介素-1B(IL-1B)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)。结果 与生理盐水对照组相比，滴注了PM2.5混悬液的各组大鼠血清中TNF-α、IL-1β及MDA水平增高，GSH-Px活力下降，除积分波微磁场(每天3次)干预组外，其余滴注了PM2.5混悬液的各组T-SOD活力下降。与PM2，暴露组相比，积分波微磁场(每天3次)干预组血清中TNF-α、IL-1B水平降低，GSH-Px及T-SOD活力升高，差异均有统计学意义。结论 积分波微磁场治疗对PM2.5混悬液气管滴注引起的大鼠血液中炎症及氧化应激变化有一定的干预作用。
关键词：PM2.5；积分波微磁场治疗仪；炎症；氧化应激 中图分类号：1094.6 文献标志码：A
近几年来，我国多次出现较严重的雾霾污染，颗粒物作为雾霾污染的核心组分，在我国的污染程度甚至超过了世界平均水平，尤其是细颗粒物(fine particulate matter，PM2.5)，由于粒径小、质量轻、能随呼吸过程进入机体，因而对人体健康的影响最为严重。PM2.5进入肺内，在损害呼吸系统的同时，其部分成分(如可溶性金属和有机成分)及损伤肺部时产生的炎性介质和血管活性成分均可穿过呼吸屏障进入循环系统，引发系统炎症及氧化应激反应，使血液中炎症因子、中性粒细胞及脂质过氧化物(lipid peroxide，LPO)水平升高，同时使抗氧化物质减少，抗氧化酶活性降低，导致机体抗氧化能力减弱。为应对PM2.5暴露对机体产生的有害作用，许多具有抗氧化或抗炎功能的药物、维生素、微量元素等已被引入拮抗PM2.5有害效应的研究。然而，医疗器械可干预PM2.5引起机体损伤的报道比较少见。积分波微磁场(pulsed electromagnetic field，PEMF)对心血管系统有保护作用。研究发现，通过脉冲电磁场作用，PEMF可促进受损组织恢复、改善机体微循环。本研究以大气PM2.5混悬液气管滴注引起血液中炎症及氧化应激指标变化的大鼠为模型，观察PEMF对PM2.5暴露引起的血液炎症因子增多及氧化应激指标变化的干预作用。
1材料与方法
1.1 PM2.5采集与混悬液制备
用Anderson G-2.5大流量采樣器(美国Thermo Fisher公司)，于2016年2—4月在上海市某居住区附近设置采样点(高度16 m)，将PM2.5采集于玻璃纤维滤膜(河北省故城县环境检测器材厂)上。采样完成后，收集滤膜于干燥器内保存。将载有PM2.5的滤膜剪成小方块(约2 cm×3 cm)，浸没于超纯水中，用JL-180 H超声波清洗机(南京科捷分析仪器有限公司产品)低温超声震荡洗脱PM2.5(20 min×5次)，悬液经12层纱布过滤，滤液用3-30 KS离心机(德国Sigma公司)于4℃条件下离心(936×g，20 min)，收集下层沉淀物用真空冷冻干燥机(北京四环科学仪器有限公司)进行冷冻干燥，干燥完成后，-20℃保存备用。参照文献，设置PM2.5暴露总剂量为40 mg/kg，积分波微磁场干预频率为3次/d、5次/d。气管滴注前，用生理盐水将PM2.5颗粒制成所需浓度悬浮液，超声震荡混匀灭菌(20 min×3次)。积分波微磁场治疗仪由百慕迪(上海)再生医学科技有限公司提供。
1.2实验动物分组及处理
健康成年SPF级SD雄性大鼠(180～200 g)36只，购于上海杰思捷实验动物有限公司(合格证号：2010002608150)。将大鼠分笼饲养于温度为21～23℃、相对湿度为40%～60%的环境中，12 h昼夜交替。1周后，将大鼠按每组6只随机分为6组。空白对照组：不做任何处理，正常饲养19 d；生理盐水对照组：先气管滴注生理盐水，隔天1次，共3次，每次1.6 mL/kg，后正常饲养14 d；PM2.5暴露组：先PM2.5混悬液气管滴注，隔天1次，共3次，每次1.6 mL/kg，总计40 mg/kg，后正常饲养14 d；积分波微磁场(3次/d)干预组、积分波微磁场(5次/d)干预组：先PM2.5混悬液气管滴注，后将大鼠置于特制鼠笼中(1只/笼)进行积分波微磁场治疗仪处理14 d，处理频率分别为3次/d(8min/次)、5次/d(8min/次)；积分波微磁场干预对照组：先正常饲养，后与干预组同时进行积分波微磁场治疗仪处理，5次/d(8 min/次)。末次处理结束24 h后，大鼠腹腔注射10%水合氯醛(3 mL/kg)麻醉，经腹主动脉收集大鼠血液，置于未加抗凝剂的离心管中，3 000 r/min离心10 min，收集血清，分装后保存于-80%冰箱。, http://www.100md.com(刘洁 曾雪娇 蒋硕等)
关键词：PM2.5；积分波微磁场治疗仪；炎症；氧化应激 中图分类号：1094.6 文献标志码：A
近几年来，我国多次出现较严重的雾霾污染，颗粒物作为雾霾污染的核心组分，在我国的污染程度甚至超过了世界平均水平，尤其是细颗粒物(fine particulate matter，PM2.5)，由于粒径小、质量轻、能随呼吸过程进入机体，因而对人体健康的影响最为严重。PM2.5进入肺内，在损害呼吸系统的同时，其部分成分(如可溶性金属和有机成分)及损伤肺部时产生的炎性介质和血管活性成分均可穿过呼吸屏障进入循环系统，引发系统炎症及氧化应激反应，使血液中炎症因子、中性粒细胞及脂质过氧化物(lipid peroxide，LPO)水平升高，同时使抗氧化物质减少，抗氧化酶活性降低，导致机体抗氧化能力减弱。为应对PM2.5暴露对机体产生的有害作用，许多具有抗氧化或抗炎功能的药物、维生素、微量元素等已被引入拮抗PM2.5有害效应的研究。然而，医疗器械可干预PM2.5引起机体损伤的报道比较少见。积分波微磁场(pulsed electromagnetic field，PEMF)对心血管系统有保护作用。研究发现，通过脉冲电磁场作用，PEMF可促进受损组织恢复、改善机体微循环。本研究以大气PM2.5混悬液气管滴注引起血液中炎症及氧化应激指标变化的大鼠为模型，观察PEMF对PM2.5暴露引起的血液炎症因子增多及氧化应激指标变化的干预作用。
1材料与方法
1.1 PM2.5采集与混悬液制备
用Anderson G-2.5大流量采樣器(美国Thermo Fisher公司)，于2016年2—4月在上海市某居住区附近设置采样点(高度16 m)，将PM2.5采集于玻璃纤维滤膜(河北省故城县环境检测器材厂)上。采样完成后，收集滤膜于干燥器内保存。将载有PM2.5的滤膜剪成小方块(约2 cm×3 cm)，浸没于超纯水中，用JL-180 H超声波清洗机(南京科捷分析仪器有限公司产品)低温超声震荡洗脱PM2.5(20 min×5次)，悬液经12层纱布过滤，滤液用3-30 KS离心机(德国Sigma公司)于4℃条件下离心(936×g，20 min)，收集下层沉淀物用真空冷冻干燥机(北京四环科学仪器有限公司)进行冷冻干燥，干燥完成后，-20℃保存备用。参照文献，设置PM2.5暴露总剂量为40 mg/kg，积分波微磁场干预频率为3次/d、5次/d。气管滴注前，用生理盐水将PM2.5颗粒制成所需浓度悬浮液，超声震荡混匀灭菌(20 min×3次)。积分波微磁场治疗仪由百慕迪(上海)再生医学科技有限公司提供。
1.2实验动物分组及处理
健康成年SPF级SD雄性大鼠(180～200 g)36只，购于上海杰思捷实验动物有限公司(合格证号：2010002608150)。将大鼠分笼饲养于温度为21～23℃、相对湿度为40%～60%的环境中，12 h昼夜交替。1周后，将大鼠按每组6只随机分为6组。空白对照组：不做任何处理，正常饲养19 d；生理盐水对照组：先气管滴注生理盐水，隔天1次，共3次，每次1.6 mL/kg，后正常饲养14 d；PM2.5暴露组：先PM2.5混悬液气管滴注，隔天1次，共3次，每次1.6 mL/kg，总计40 mg/kg，后正常饲养14 d；积分波微磁场(3次/d)干预组、积分波微磁场(5次/d)干预组：先PM2.5混悬液气管滴注，后将大鼠置于特制鼠笼中(1只/笼)进行积分波微磁场治疗仪处理14 d，处理频率分别为3次/d(8min/次)、5次/d(8min/次)；积分波微磁场干预对照组：先正常饲养，后与干预组同时进行积分波微磁场治疗仪处理，5次/d(8 min/次)。末次处理结束24 h后，大鼠腹腔注射10%水合氯醛(3 mL/kg)麻醉，经腹主动脉收集大鼠血液，置于未加抗凝剂的离心管中，3 000 r/min离心10 min，收集血清，分装后保存于-80%冰箱。, http://www.100md.com(刘洁 曾雪娇 蒋硕等)