体外过敏原检测系统临床应用价值探讨
[中图分类号]R446.11 [文献标识码]A [文章编号]1005-0019(2009)9-0066-01
过敏是最常见的一种变态反应，涉及面广，最常见的是过敏性鼻炎、花粉症及过敏性哮喘。国内现有的检测手段仅能测定总IgE和有限的几种最常见的特异性IgE，而在很多情况下，尚无法确定过敏原是什么，因而导致过敏源的检测在很多领域中未能引起应有的关注而加以推广应用，与国外的进展相差甚远，存在较多的空白领域。
防治过敏反应性疾病的关键在于发现过敏原并有效避免与之接触。传统皮试方法既痛苦又受药物方面的影响，对于高敏体质患者具有一定的生命危险性，因此过敏原体外检测方法已成为一种必然的趋势。
我科07年从德国引进的体外过敏原检测系统填补了这一领域的空白，克服了传统方法的缺点。定量检测人的血清中特异性IgE，用于辅助诊治各种过敏性性疾病，本文通过近两年的临床实践探讨其应用价值。
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1 资料和方法
1.1 一般资料：2007年7月-2009年3月，在我科门诊及病房患者233例，男99例，女134例，年龄5-70岁，平均年龄52岁。静脉采血4ml，分离血清，冷藏备用。
1.2 方法与材料
1.2.1 方法：采静脉血4ml并分离血清。根据操作手册步骤如下：(1)从冰箱里取出试剂盒，放至室温，在测试板上用记号笔编号。(2)在测试板的膜条上加入400ul起始液(蓝色)，让其停留数秒钟，然后倒空并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(3)立即吸取400ul血清标本加到每块测试板膜条上，使其在常温摇床上振动孵育45分钟，将血清标本倒空，用4ml冲洗液冲洗两次，加入400ul冲洗液在摇床上常温孵育5分钟，用4ml的冲洗液冲洗两次，然后倒空并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(4)吸取400ul第一抗体(绿色)加到每块测试板膜条上，常温摇床上振动孵育45分钟，倒空用4mI的冲洗液冲洗两次，并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(5)吸取400ul第二抗体(白色)加到每块测试板的膜条上，常温摇床上振动孵育20分钟，倒空用4ml的冲洗液冲洗两次，并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(6)吸取400ul底物溶液(黑色)加到每块测试板的膜条上，在避光处加盖常温摇床上振动孵育20分钟，倒空用4ml的冲洗液冲洗两次，并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。在空气中干燥约15分钟，然后利用平板扫描装置和计算机系统进行测定。
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1.2.2 仪器：德国PCA过敏原检测仪。
1.2.3 试剂：德国PCA专用试剂。
1.2.4 结果判断：采用独特的固相酶斑点专利技术，用于定量检测血清中的抗过敏原特异性IgE抗体，使用PCA专用软件和平板扫描装置，经过六条标准带产生的标准曲线对比并自动计算，即可得到精确的过敏原浓度，分成0-6级，其中0-6级代表浓度分别为：阴性；临床可疑，常常没有过敏症候；弱阳性，经常有过敏症候；阳性，经常有过敏症候；强阳性，经常过敏；强阳性；极强阳性。
2 各种疾病检测阳性结果分析
花粉症，鼻炎季节性发病，过敏性哮喘阳性结果多为艾草、屋尘螨、粉尘螨、杨树、兽毛等，尤其艾草有的高达6级，荨麻疹等皮肤过敏患者多为蛋白、鱼虾、苹果、兽毛等。
3 讨论
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3.1 近年来，过敏性疾病发病率日趋升高，涉及的疾病也极其广泛，患各种过敏性反应性疾病如：花粉症、特异性湿疹、外因性气喘时，患者血清中存在特异性过敏原。检测特异性过敏原对诊断引起变态反应的物质基础及选择合适免疫治疗具有重要价值，我科过敏原检测中，大多数为过敏性鼻炎、哮喘，湿疹也很多见，前者多为吸入方面的原因，如：花粉、尘螨、动物毛皮屑等，后者在食物方面常见，有鱼、虾等，因此通过过敏原检测寻找病因，将成为诊断疾病的重要手段。
3.2 呼吸科各类发病的病例中，过敏原也是较为常见的致病因素，70%是由过敏原致病的。支气管哮喘是一种常见的变态反应，简称哮喘，是一种以嗜酸性粒细胞、肥大细胞反应为主的气道变态炎症和呼吸道高反应性为特性的疾病。临床表现为反复发作性伴有哮鸣音的呼气性呼吸困难、胸闷或咳嗽，可自行或治疗后缓解，临床上分为外源性哮喘和内源性哮喘。外源性哮喘是由变应原引起的，在缓解期应作特异性过敏原检测，这样可以避免或消除引起哮喘发作的变应原。
3.3 儿科中的过敏性反应性疾病也较为常见。在儿童慢性咳嗽中，过敏原是重要的原因之一。气喘或敏感性呼吸道是气管在接受过敏原或非过敏原刺激物(如：二手烟、污染的空气)刺激后，气管内产生平滑肌收缩、黏膜水肿、分泌物增加、炎细胞侵润等炎症现象。过敏性婴儿湿疹，小儿遗尿、小儿乳糜泻等都是常见的过敏反应。预防小儿过敏性疾病的产生，要从出生起即开始避免接触过敏原。高过敏家庭中怀孕妇女，最好从4个月起就要避免接触过敏原。新生儿于出生后的六个月内，最好母乳喂养并尽量减少接触粉尘、二手烟、猫狗等宠物。
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3.4 另外，过敏原疾病与其他疾病相关，如：耳鼻喉科常见的过敏性鼻炎、变应性喉水肿；口腔科常见的复发性口腔溃疡；神经内科常见的癫痫大发作、过敏性头疼等；消化科常见的消化不良、暖气、胃炎、胃溃疡、乳糜泻、溃疡性结肠炎等。
4 总结
在医学领域中，由于过敏原的多样性，也就决定了过敏性反应性疾病的复杂性。很多情况下，无法确定过敏原是什么。现有的检测方法中，从阳性例数分析，花粉是最常见的致病源，其次为尘螨和粉尘。从我科监测的病例中，动物毛也是常见的致病原。体外过敏原检测是一种筛查和寻找过敏原的重要的检测手段，通过检测系统寻找病因，脱离接触并积极对症脱敏治疗是一种科学的，唯一摆脱过敏性疾病困扰的最佳手段。
参考文献
[1]张颖，杨兆红，皮肤过敏原实验结果的影响因素及对策，现代诊断与治疗，2000，3(11)：112-113
[2]余声华，钟韩荣，过敏原监测系统在高危哮喘儿中的应用，中华儿科杂志，2002，40(10)：605-607, 百拇医药
过敏是最常见的一种变态反应，涉及面广，最常见的是过敏性鼻炎、花粉症及过敏性哮喘。国内现有的检测手段仅能测定总IgE和有限的几种最常见的特异性IgE，而在很多情况下，尚无法确定过敏原是什么，因而导致过敏源的检测在很多领域中未能引起应有的关注而加以推广应用，与国外的进展相差甚远，存在较多的空白领域。
防治过敏反应性疾病的关键在于发现过敏原并有效避免与之接触。传统皮试方法既痛苦又受药物方面的影响，对于高敏体质患者具有一定的生命危险性，因此过敏原体外检测方法已成为一种必然的趋势。
我科07年从德国引进的体外过敏原检测系统填补了这一领域的空白，克服了传统方法的缺点。定量检测人的血清中特异性IgE，用于辅助诊治各种过敏性性疾病，本文通过近两年的临床实践探讨其应用价值。
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1 资料和方法
1.1 一般资料：2007年7月-2009年3月，在我科门诊及病房患者233例，男99例，女134例，年龄5-70岁，平均年龄52岁。静脉采血4ml，分离血清，冷藏备用。
1.2 方法与材料
1.2.1 方法：采静脉血4ml并分离血清。根据操作手册步骤如下：(1)从冰箱里取出试剂盒，放至室温，在测试板上用记号笔编号。(2)在测试板的膜条上加入400ul起始液(蓝色)，让其停留数秒钟，然后倒空并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(3)立即吸取400ul血清标本加到每块测试板膜条上，使其在常温摇床上振动孵育45分钟，将血清标本倒空，用4ml冲洗液冲洗两次，加入400ul冲洗液在摇床上常温孵育5分钟，用4ml的冲洗液冲洗两次，然后倒空并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(4)吸取400ul第一抗体(绿色)加到每块测试板膜条上，常温摇床上振动孵育45分钟，倒空用4mI的冲洗液冲洗两次，并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(5)吸取400ul第二抗体(白色)加到每块测试板的膜条上，常温摇床上振动孵育20分钟，倒空用4ml的冲洗液冲洗两次，并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。(6)吸取400ul底物溶液(黑色)加到每块测试板的膜条上，在避光处加盖常温摇床上振动孵育20分钟，倒空用4ml的冲洗液冲洗两次，并在吸水纸上拍击测试板，尽量去除膜条上的洗液。在空气中干燥约15分钟，然后利用平板扫描装置和计算机系统进行测定。
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1.2.2 仪器：德国PCA过敏原检测仪。
1.2.3 试剂：德国PCA专用试剂。
1.2.4 结果判断：采用独特的固相酶斑点专利技术，用于定量检测血清中的抗过敏原特异性IgE抗体，使用PCA专用软件和平板扫描装置，经过六条标准带产生的标准曲线对比并自动计算，即可得到精确的过敏原浓度，分成0-6级，其中0-6级代表浓度分别为：阴性；临床可疑，常常没有过敏症候；弱阳性，经常有过敏症候；阳性，经常有过敏症候；强阳性，经常过敏；强阳性；极强阳性。
2 各种疾病检测阳性结果分析
花粉症，鼻炎季节性发病，过敏性哮喘阳性结果多为艾草、屋尘螨、粉尘螨、杨树、兽毛等，尤其艾草有的高达6级，荨麻疹等皮肤过敏患者多为蛋白、鱼虾、苹果、兽毛等。
3 讨论
, http://www.100md.com
3.1 近年来，过敏性疾病发病率日趋升高，涉及的疾病也极其广泛，患各种过敏性反应性疾病如：花粉症、特异性湿疹、外因性气喘时，患者血清中存在特异性过敏原。检测特异性过敏原对诊断引起变态反应的物质基础及选择合适免疫治疗具有重要价值，我科过敏原检测中，大多数为过敏性鼻炎、哮喘，湿疹也很多见，前者多为吸入方面的原因，如：花粉、尘螨、动物毛皮屑等，后者在食物方面常见，有鱼、虾等，因此通过过敏原检测寻找病因，将成为诊断疾病的重要手段。
3.2 呼吸科各类发病的病例中，过敏原也是较为常见的致病因素，70%是由过敏原致病的。支气管哮喘是一种常见的变态反应，简称哮喘，是一种以嗜酸性粒细胞、肥大细胞反应为主的气道变态炎症和呼吸道高反应性为特性的疾病。临床表现为反复发作性伴有哮鸣音的呼气性呼吸困难、胸闷或咳嗽，可自行或治疗后缓解，临床上分为外源性哮喘和内源性哮喘。外源性哮喘是由变应原引起的，在缓解期应作特异性过敏原检测，这样可以避免或消除引起哮喘发作的变应原。
3.3 儿科中的过敏性反应性疾病也较为常见。在儿童慢性咳嗽中，过敏原是重要的原因之一。气喘或敏感性呼吸道是气管在接受过敏原或非过敏原刺激物(如：二手烟、污染的空气)刺激后，气管内产生平滑肌收缩、黏膜水肿、分泌物增加、炎细胞侵润等炎症现象。过敏性婴儿湿疹，小儿遗尿、小儿乳糜泻等都是常见的过敏反应。预防小儿过敏性疾病的产生，要从出生起即开始避免接触过敏原。高过敏家庭中怀孕妇女，最好从4个月起就要避免接触过敏原。新生儿于出生后的六个月内，最好母乳喂养并尽量减少接触粉尘、二手烟、猫狗等宠物。
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3.4 另外，过敏原疾病与其他疾病相关，如：耳鼻喉科常见的过敏性鼻炎、变应性喉水肿；口腔科常见的复发性口腔溃疡；神经内科常见的癫痫大发作、过敏性头疼等；消化科常见的消化不良、暖气、胃炎、胃溃疡、乳糜泻、溃疡性结肠炎等。
4 总结
在医学领域中，由于过敏原的多样性，也就决定了过敏性反应性疾病的复杂性。很多情况下，无法确定过敏原是什么。现有的检测方法中，从阳性例数分析，花粉是最常见的致病源，其次为尘螨和粉尘。从我科监测的病例中，动物毛也是常见的致病原。体外过敏原检测是一种筛查和寻找过敏原的重要的检测手段，通过检测系统寻找病因，脱离接触并积极对症脱敏治疗是一种科学的，唯一摆脱过敏性疾病困扰的最佳手段。
参考文献
[1]张颖，杨兆红，皮肤过敏原实验结果的影响因素及对策，现代诊断与治疗，2000，3(11)：112-113
[2]余声华，钟韩荣，过敏原监测系统在高危哮喘儿中的应用，中华儿科杂志，2002，40(10)：605-607, 百拇医药