雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滑膜细胞VEGF\VEGFR2 mRNA表达的影响
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【摘要】目的 探讨雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滑膜细胞VEGF、VEGFR2 mRNA表达的影响。方法 取风湿性关节炎导致关节畸形进行关节置换手术病人的关节滑膜组织进行原代培养，传代后进行雷公藤多苷干预，利用实时荧光定量PCR检测滑膜细胞中VEGF、VEGFR2 mRNA表达水平情况。结果 成功自人滑膜组织中培养出成纤维样滑膜细胞，雷公藤多苷干预后滑膜细胞中VEGF、VEGFR2 mRNA表达水平降低。结论 阻断VEGF/VEGFR2信号通路，从而抑制血管生成是雷公藤多苷有效治疗类风湿关节炎的途径之一。
【关键词】类风湿关节炎 雷公藤多苷 实时荧光定量PCR VEGF；VEGFR2
中图分类号：R593.21 文献标识码：B 文章编号：1005-0515(2011)4-045-02
The influence of tripterygium glycosides in VEGF, VEGFR2 mRNA expression of synovial cells in patients with rheumatoid arthritis
Wang Jia1,2 Li Qian1 Gao Feng2 Yang Xuewen1，2*
(1 Nanjing University of Chinese Medicine,2 Jiangsu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine)
【Abstract】Objective To investigate tripterygium glycosides in VEGF, VEGFR2 mRNA expression of synovial cells in patients with rheumatoid arthritis. Methods Synovial tissue of rheumatoid arthritis leading to joint deformity which is joint replacement surgery patients were cultured and intervented by tripterygium glycosides. Real-time fluorescence quantitative PCR detection of the VEGF, VEGFR2 mRNA expression of synovial cells was used.Results Successfully cultured fibroblast-like synoiocytes(FLS ) cells,after the intervention of tripterygium glycosides(TwP)to synovial cells the VEGF, VEGFR2 mRNA expression decreased.Conclusion Blocking VEGF/VEGFR2 signaling pathway, thereby inhibiting angiogenesis is one of the effective means of tripterygium glycosides to rheumatoid arthritis.
【Key words】rheumatoid arthritis TwP real-time quantitative PCR VEGF VEGFR2
血管翳是一种以血管增生、炎性细胞浸润为特征的滑膜组织，其形成是类风湿关节炎(RA)的重要病理特征，新生血管形成即从原有的微血管处形成新的毛细血管，是产生和维持RA血管翳的主要因素[1]，成纤维样滑膜细胞则认为是RA病理改变的最终靶细胞[2]。近年来，人们己经认识到血管生成在RA的侵蚀和破坏过程中发挥了重要作用，中断血管生成在RA的治疗中有着重要的意义[3]。雷公藤多苷是驱风湿的常用药，具有抗炎及免疫抑制和抗肿瘤等作用[4, 5]，有研究认为雷公藤多苷能显著改善CIA大鼠膝关节滑膜炎症、增生、新生血管生成等病变[6]，但未从血管生成的机制上进行阐述。我们取临床因RA导致关节畸形需进行关节置换手术病人的关节滑膜组织进行原代培养，获得成纤维样滑膜细胞，传代后进行雷公藤多苷干预，分析滑膜细胞血管生成相关因子VEGF、VEGFR2 mRNA表达水平情况，进行VEGF/VEGFR2信号通路分析。
1 材料和方法
1.1 标本来源 人滑膜组织取自我院2009年3月至2010年2月由于风湿性关节炎导致关节畸形，进行关节置换手术病人的关节滑膜组织18例。
1.2 试剂和仪器 高糖型DMEM(美国Gibco公司)，胎牛血清(杭州四季青公司)，胰蛋白酶(美国Gibco公司)，台盼蓝染色液(北京赛驰生物公司)，含雷公藤多苷、沙利度胺的大鼠血清(本院动物中心提供), Trizol、DNA marker(大连TaKaRa公司)，M-MLV等逆转录试剂、Taq酶(美国MBI公司)。引物、探针、标准品构建委托由Invitrogen公司合成 ......
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