RP-HPLC同时测定复合氨基酸胶囊中五种水溶性维生素的含量
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参见附件(2452KB，2页)。
【摘要】目的 建立复合氨基酸胶囊中5种水溶性维生素的含量测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，流动相为乙腈与0.04%戊烷磺酸钠溶液(用醋酸调pH3.0)，流速1.0 ml/min，柱温25℃ ，检测波长为275 nm，进样量为10μl。结果 维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺检测浓度的线性范围分别为0.06637～0.33185、0.01651～0.08255、0.0105～0.0525、0.008867～0.044335、0.006987～ 0.034935 mg/ml；平均回收率分别为101.34%、101.98%、98.48%、100.23%、102.56%,RSD分别为1.89%、1.43%、1.48%、0.75%和0.95%。结论 此法准确、简便、快捷、经济，可以同时测定复合氨基酸胶囊中维生素C、维生素B1 、维生素B2 、维生素B6和烟酰胺的含量。
【关键词】复合氨基酸胶囊 水溶性维生素 高效液相色谱法
中图分类号：R927 文献标识码：B 文章编号：1005-0515(2011)5-253-02
Simultaneous Determ ination of five water soluble vitam in compound amino acid capsulesby Reversed-phase HPLC
Yangyong Hanyonghui
(Guizhou Shenqi Pharmaceuticals Co.,Ltd.,Guizhou 550004,China)
【Abstract】Objective To establish a method for assaying five water-soluble vitamins in compound amino acid capsules，Methods By high pefomance liquid chromatography method，the mobile phase consisted of acetonitrile-0.04% 1-Pentanesulfonic Acid Sodium Salt solution(adjusted to pH3.0 with acetic acid),The flow rate was 1.0 ml/min.Column Was Cl8 and was maintained at a constant temperature of about 25℃.Th e detection wavelength was 275 nm.The injecting volume was 10μl.Results The linear ranges of VitC，ViB1，VitB2，VitB6 and niacinamide were 0.06637～0.33185、0.01651～0.08255、0.0105～0.0525、0.008867～0.044335、0.006987～ 0.034935 mg/ml respectively;the average recoveries were 101.34% 、101.98% 、98.48% 、100.23% 、102.56% ,with RSD of 1.89% 、1.43% 、1.48%、0.75%和0.95%。Conclusion This method is found to be accurate，simple，quick and saving.It can assay simuh a.neously for VitC 、VitB1、VitB2、VitB6 and niaeinamide in compound amino acid capsules.
【Key words】compound amino acid capsules water-soluble vitamins HPLC
复合氨基酸胶囊由8种氨基酸及11种维生素等组成。虽然有关水溶性维生素含量测定方法的研究报道已有很多，但由于处方、制剂的不同，导致在具体应用时并非每一种分析方法都是通用的。本文建立了一种新的水溶性维生素含量测定分析方法，可同时测定复合氨基酸胶囊中维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺的含量，其它成分无干扰。
1 材料
1.1 仪器
P680戴安高效液相色谱仪，UV170U紫外检测器，赛多利斯BP211D电子天平，超声波发生器。
1.2 试药
维生素C、维生素B1、维生素B2 、维生素B6和烟酰胺对照品(中国药品生物制品检定所)，乙腈(色谱纯)，戊烷磺酸钠(分析纯)，醋酸酸(分析纯)，复合维生素胶囊样品(贵州神奇神制药有限公司)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A：乙腈；流动相B:0.04%戊烷磺酸钠溶液(用醋酸调pH3.0),梯度洗脱(0.0～8分钟，96%B ；9～15分钟，90% B，16～27分钟，87%B))，流速：1.0ml/min，进样量：10μl，检测波长为275nm，柱温25℃。
按上述条件进行检测，复合维生素胶囊中维生素C 、维生素B1、维生素B2 、维生素B6和烟酰胺得到很好的分离，分离度分别为：1.67、1.83、1.78、1.73和1.66，理论板数均不低于2000(见下图)。
复合氨基酸胶囊高效液相色谱图
2.2 线性关系
精密称取维生素C、维生素B1、B2、维生素B6与烟酰胺对照品适量，用0.01mol/L盐酸溶液(含0.1%的偏磷酸)溶解并定量稀释制成每1ml中分别约含0.2mg、0.05mg、0.03mg、0.025mg与0.02mg的混合对照品溶液。分别精密量取上述混合对照品溶液各3?l、6?l、9?l、12l、15?l进样，记录色谱图，以峰面积Y(mAU)为纵坐标，进样量X(μg)为横坐标，作图，维生素C回归方程为Y=5237.3X+0.1104(r =0.9998), 维生素B1 回归方程为Y=17845x-0.0101(r=0.99999), 维生素B2回归方程为Y=65211x-0.1149(r=0.9999), 维生素B6回归方程为Y=7507.4x+0.001 (r= 0 ......
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