生殖道HPV感染合并CT感染情况分析
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[摘要] 目的 对比HPV感染组之间合并CT病原体的感染情况探讨生殖道HPV感染合并其他病原体感染对宫颈癌的发生、发展的影响。方法 收集经检测已知为HPV分型一种亚型或合并多种亚型呈阳性的宫颈分泌物DNA提取液174例，HPV分型亚型呈阴性的宫颈分泌物DNA提取液86例，应用PCR结合反向寡核苷酸探针杂交技术(ROB)检测；应用实施荧光定量PCR扩增检测技术(FQ-PCR)对上述标本进行测定。 结果 ①HPV阳性组174例和HPV阴性组合并CT病原体感染的检出率分别为74.71%和49.42%；②HPV阳性组中合并CT感染的检出率为24.13%，HPV阴性组合并CT感染的检出率为6.98%；③HPV阳性组中高危组合并CT感染的检出率为17.94%；④HPV阳性组中以16亚型的合并感染率最高;⑤在174例HPV阳性组的60例中CT感染的检出率30.43%。结论 宫颈上皮细胞HPV感染与宫颈癌的发生、发展有密切关系。多种病原体同时感染宫颈与宫颈癌的发生、发展及预后的关系有待进一步研究
[关键词] HPV； CT； FQ-PCR； RBD； 宫颈癌
[中图分类号] R711.74[文献标识码] A[文章编号] 1005-0515(2011)-08-001-02
宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤，是女性的第二大杀手，其患病率及病死率约占世界三分之一[1]。研究表明，人乳头瘤病毒(HPV)是引起子宫颈癌的主要病因。HPV病毒的感染使宫颈癌的相对危险性增加250倍。本文采用PCR结合反向寡核苷酸探针杂交技术检测(ROB)和实施荧光定量PCR扩增检测技术(FQ-PCR)，对174例人乳头瘤病毒分型一种亚型或混合多种亚型呈阳性的宫颈分泌物DNA提取液及86例HPV分型亚型呈阴性的宫颈分泌物DNA提取液进行合并沙眼衣原体(CT)的检测。拟在通过HPV感染组与HPV未感染组之间合并CT病原体的感染情况的对比，探讨生殖道HPV感染合并其他病原体感染与宫颈癌发生、发展的影响。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本文收集我院2008年1月到2011年9月间我院健康普查的机关工作人员2586例采用PCR结合反向寡核苷酸探针杂交技术检测(ROB)的已知为HPV分型一种亚型或混合多种亚型呈阳性的宫颈分泌物DNA提取液174例以及HPV分型亚型呈阴性的宫颈分泌物DNA提取液86例。标本采用深圳市亚能生物有限公司提供的HPV分型基因芯片检测试剂盒检测。
1.2 试剂和方法 将HPV分型阳性的宫颈分泌物DNA提取液174例及HPV分型阴性的宫颈分泌物DNA提取液86例作为模板。利用深圳市匹基生物有限公司提供的CT核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒，采用实施荧光定量PCR扩增检测技术(FQ-PCR)对上述标本进行测定,按试剂盒要求进行PCR扩增。反映总体积设为40微升。扩增条件设为：37℃5min,94℃1min,95℃5s,60℃40s,共40个循环。DNA模板量为2微升。
2 结果 1)HPV阳性组(174例)和HPV阴性组(86例)。合并CT病原体感染的检出率分别为74.71%和49.42%，HPV阳性组合并感染者明显高于HPV阴性组合并感染者。2)HPV阳性组(174例)中合并CT感染的检出率为24.13%(42例)；HPV阴性组(86例)合并CT感染的检出率为6.98%(6例)。从检测结果看HPV阳性组合并CT感染者高于HPV阴性感染者。有文献报道，CT是引起女性生殖道感染的常见病原体，可导致宫颈炎，主要侵犯柱状上皮细胞，尤其是鳞柱交界区。CT感染可导致宫颈上皮发生癌前病变，提示在宫颈癌的预防上CT感染不可忽视。3)HPV阳性组按亚型不同可分为高危型组和低危型组，其中高危型组(156例)中合并CT感染的检出率为17.94%(28例)，低危型组(18例)中合并CT感染的检出率为77.78%(14例)。4)本实验表明HPV16是174例HPV阳性组中合并感染最多的亚型共52例。HPV16亚型中有8例合并CT感染。当HPV高危型16、18、33、58等合并CT感染时，应高度警惕宫颈癌的发生。见表1。5)在174例HPV阳性组的病例中查到60例有阴道镜检为不同级别的宫颈上皮内瘤样变(CINⅠ-Ⅲ级)病例资料(其余114例无阴道镜检资料记录)。其中有14例合并CT感染占30.43%。有14例HPV阳性CIN病例不合并CT感染。HPV感染的细胞发生恶性变同时需要其他致癌因子的协同作用[2]，因而HPV并非宫颈癌发生、发展的唯一因素。
表1HPV阳性组中不同亚型合并CT感染的检出率
3 讨论 目前已知HPV有近100个基因型，其中有23种HPV型可感染生殖器粘膜。HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59称为高危型，高危型与宫颈癌及宫颈上皮内高度病变(CINⅡ-Ⅲ)的发生相关。99.7%宫颈癌中存在高危HPV感染；HPV6、11、42、43和44属于低危型，可引起外生殖器湿疣等良性病变，包括宫颈内上皮的低度病变(CINⅠ)。故本文中HPV阳性高危型组合并CT感染最高，其次是HPV阳性低危型组，HPV阴性组最低。这可能是由于宫颈癌的发生、发展是从炎症过度到癌的一个慢性积累过程，这种积累可能是正常组织细胞同时受多种病原体数年乃至数十年的持续感染的损伤，也可能是在多种因素的影响下病原体DNA在细胞分裂过程中整合到了正常组织细胞DNA中 ......
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