胶体金法检测HBsAg的应用评估
【摘要】 目的采用酶联免疫方法(ELISA)对经胶体金法(GICA)初筛HBsAg阴性血清进行复检,对其应用进行评估。 方法 用酶联免疫方法对经GICA法初筛HBsAg阴性的3523份样本进行复检。 结果 3523份胶体金试纸条初筛阴性样本,经ELISA检测,其中有21份样本为阳性,漏检率为0.60%。再次用胶体金试纸条对ELISA检测出的21份阳性样品进行检测,检出5例,占漏检率的23.8%,其中10-15min内检出3例,20min检出1例,25min检出1例。 结论 GICA简便、快速,便于献血员现场采血前的筛选,但其敏感性低于ELISA,有一定的漏检率。
【关键词】胶体金法; HBsAg;酶联免疫方法
【中图分类号】R446.11+3【文献标识码】 B 【文章编号】1005-0515(2010)005-065-01
我国是乙型肝炎的高发区,HBsAg携带率0.1%-15%[1] ,又是经血液传播性疾病 ,所以卫生部把HBsAg 检测作为无偿献血的检测项目之一。GICA[2]检测HBsAg 具有简便、快速、结果直观、可单份操作等优点 ,能满足快速检验的需要 ,尤其为无偿献血者现场采血前检测 HBsAg 提供了便利的条件 ,目前已广泛使用。但实际工作中可能存在反应迟缓和漏检现象。本研究用ELISA和GICA进行对比分析,以评价GICA在快速诊断的价值。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 标本来源来自2009年6月本血站的无偿献血者,GICA检测HBsAg阴性标本3523份。
1.2 试剂和仪器HBsAg胶体金试纸为新创科技有限公司产品,试剂批号为20090501;ELISA试剂由新创科技有限公司提供,批号2009042114;RSP150 全自动加样系统、FAME24/20全自动酶联分析系统。
1.3 方法对胶体金法检测为阴性的血清,用ELISA进行复检,检测操作步骤及结果判断按照试剂使用说明书进行。对检出的阳性及可疑标本,再用同种试剂双孔复查,其中任一孔S/CO值≥1即可确定为阳性。ELISA确定阳性标本再次用胶体金试纸条检测。
2 结果
胶体金法检测的HBsAg阴性标本3523 份, 经ELISA法复检, 检出阳性21份, 阳性率为0.6% ,漏检21份,漏检率为0.6 %。对漏检的21份阳性样本,再次用胶体金法进行检测,检出5份阳性,占漏检数的23.8 %,其中10-15min内检出3例,20min检出1例,25min检出1例。查这5份标本在ELISA法中的S/CO值均>2.5,其余未检出的16份标本S/CO值均<2.5,表示HBsAg浓度较低的标本,胶体金法无法检测到。
, 百拇医药
3 讨论
在无偿献血采血前应用GICA快速检测HBsAg,可以有效地筛选出部分不合格者献血,不仅可以明显减少血液浪费,提高血液采集效率,而且降低了血液成本,进一步提高了血液的安全和质量。但由于其灵敏度(≥1ng/ml)低于ELISA(≤1ng/ml也可部分检出)[3],存在一定漏检,为此为保障临床用血安全,经快速筛查为阴性的血液,仍需ELISA复检,可明显降低漏检率。
操作者的标准化操作[4]也是非常重要的,按操作规定,加血量应100μl 左右,如果采血不顺利,过分挤压,可引起组织液混入血清,造成待测的HBsAg 浓度过低,引起漏检。若将血快速加在滤膜上,一方面会造成血液外溢,另一方面滤膜无法有效地阻挡红细胞,造成检测背景呈红色,影响结果判断。说明书注明30min内观察结果,但在有大量献血者献血时,等待30min观察结果不太现实,所以弱阳性标本可能还没有显色,操作者误认为反应时间已到。所以在实际工作中,应尽可能地延长观察时间,以减少弱阳性标本的漏检。
, 百拇医药
选用敏感性高、渗透速度快、微孔膜均一性好,且密封、干燥保存的高质量试纸条,可保证HBsAg 检测的准确性。胶体金法由于在室温反应,所以应避免在过高或过低的温度下进行实验,试纸条开封后应尽快进行检测,以免受潮影响实验结果。
通过上述分析,为提高胶体金法的检出率,减少漏检率,首先应增强操作人员的责任心,严格按照试剂说明书操作,严格控制反应时间、反应条件,在温度较低情况下,可以适当延长反应时间等。在以后工作中,如果能过一步研究漏检现象,并且做好防范,胶体金法可以在血液初筛方面有更广泛的应用。
参考文献
1.唐海琼. 胶体金免疫层析法检测HBsAg的临床价值[J].广西医学,2008,1(30):76-77.
2.何小维,赵喜红,刘晓云.等.胶体金快速诊断技术的研究进展[J].中国人兽共患学报,2007,23(1):86-88.
3.包青春,杨国香,李凤娥.胶体金检测HBsAg漏检原因分析[J].内蒙古医学杂志,2008,40(2):187-188.
4.李生菊. 金标法快速检测HBsAg漏检原因分析[J].青海医药杂志,2007,15 (9) :31232
(责任审校:周婷婷), 百拇医药(段 荣)
【关键词】胶体金法; HBsAg;酶联免疫方法
【中图分类号】R446.11+3【文献标识码】 B 【文章编号】1005-0515(2010)005-065-01
我国是乙型肝炎的高发区,HBsAg携带率0.1%-15%[1] ,又是经血液传播性疾病 ,所以卫生部把HBsAg 检测作为无偿献血的检测项目之一。GICA[2]检测HBsAg 具有简便、快速、结果直观、可单份操作等优点 ,能满足快速检验的需要 ,尤其为无偿献血者现场采血前检测 HBsAg 提供了便利的条件 ,目前已广泛使用。但实际工作中可能存在反应迟缓和漏检现象。本研究用ELISA和GICA进行对比分析,以评价GICA在快速诊断的价值。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 标本来源来自2009年6月本血站的无偿献血者,GICA检测HBsAg阴性标本3523份。
1.2 试剂和仪器HBsAg胶体金试纸为新创科技有限公司产品,试剂批号为20090501;ELISA试剂由新创科技有限公司提供,批号2009042114;RSP150 全自动加样系统、FAME24/20全自动酶联分析系统。
1.3 方法对胶体金法检测为阴性的血清,用ELISA进行复检,检测操作步骤及结果判断按照试剂使用说明书进行。对检出的阳性及可疑标本,再用同种试剂双孔复查,其中任一孔S/CO值≥1即可确定为阳性。ELISA确定阳性标本再次用胶体金试纸条检测。
2 结果
胶体金法检测的HBsAg阴性标本3523 份, 经ELISA法复检, 检出阳性21份, 阳性率为0.6% ,漏检21份,漏检率为0.6 %。对漏检的21份阳性样本,再次用胶体金法进行检测,检出5份阳性,占漏检数的23.8 %,其中10-15min内检出3例,20min检出1例,25min检出1例。查这5份标本在ELISA法中的S/CO值均>2.5,其余未检出的16份标本S/CO值均<2.5,表示HBsAg浓度较低的标本,胶体金法无法检测到。
, 百拇医药
3 讨论
在无偿献血采血前应用GICA快速检测HBsAg,可以有效地筛选出部分不合格者献血,不仅可以明显减少血液浪费,提高血液采集效率,而且降低了血液成本,进一步提高了血液的安全和质量。但由于其灵敏度(≥1ng/ml)低于ELISA(≤1ng/ml也可部分检出)[3],存在一定漏检,为此为保障临床用血安全,经快速筛查为阴性的血液,仍需ELISA复检,可明显降低漏检率。
操作者的标准化操作[4]也是非常重要的,按操作规定,加血量应100μl 左右,如果采血不顺利,过分挤压,可引起组织液混入血清,造成待测的HBsAg 浓度过低,引起漏检。若将血快速加在滤膜上,一方面会造成血液外溢,另一方面滤膜无法有效地阻挡红细胞,造成检测背景呈红色,影响结果判断。说明书注明30min内观察结果,但在有大量献血者献血时,等待30min观察结果不太现实,所以弱阳性标本可能还没有显色,操作者误认为反应时间已到。所以在实际工作中,应尽可能地延长观察时间,以减少弱阳性标本的漏检。
, 百拇医药
选用敏感性高、渗透速度快、微孔膜均一性好,且密封、干燥保存的高质量试纸条,可保证HBsAg 检测的准确性。胶体金法由于在室温反应,所以应避免在过高或过低的温度下进行实验,试纸条开封后应尽快进行检测,以免受潮影响实验结果。
通过上述分析,为提高胶体金法的检出率,减少漏检率,首先应增强操作人员的责任心,严格按照试剂说明书操作,严格控制反应时间、反应条件,在温度较低情况下,可以适当延长反应时间等。在以后工作中,如果能过一步研究漏检现象,并且做好防范,胶体金法可以在血液初筛方面有更广泛的应用。
参考文献
1.唐海琼. 胶体金免疫层析法检测HBsAg的临床价值[J].广西医学,2008,1(30):76-77.
2.何小维,赵喜红,刘晓云.等.胶体金快速诊断技术的研究进展[J].中国人兽共患学报,2007,23(1):86-88.
3.包青春,杨国香,李凤娥.胶体金检测HBsAg漏检原因分析[J].内蒙古医学杂志,2008,40(2):187-188.
4.李生菊. 金标法快速检测HBsAg漏检原因分析[J].青海医药杂志,2007,15 (9) :31232
(责任审校:周婷婷), 百拇医药(段 荣)