MMP-9及TIMP-1在口腔白斑及白斑癌变组织中的表达及意义(1)
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【摘要】目的：探讨MMP-9、TIMP-1在口腔癌变发病机制中的作用和意义。方法:采用免疫组化染色SP法对人口腔粘膜白斑50例、白斑癌变患者18例及正常口腔粘膜18例的粘膜鳞状上皮细胞MMP-9及TIMP-1表达进行半定量性分析。结果: 粘膜白斑.白斑癌变MMP-9 、 TIMP-l的表达均高于正常口腔黏膜组织( P < 0.05)。MMP-9表达强度依次递增，TIMP-1表达强度依次递减。结论： MM P-9可能在口腔白斑的发生发展中起重要作用，其活性受T IM P-1的负性调控。
【关键词】白斑；基质金属蛋白酶-9；基质金属蛋白酶抑制剂-1；免疫组织化学；白斑癌变
MMP -9 and TIM P-1 in oral leukoplakia and leukoplakia tissues and its significance
【Abstract】 Objective MMP -9 and TIM P-1 in oral leukoplakia and leukoplakia tissues and its significance. Methods: Immunohistochemistry SP method were 50 cases of oral leukoplakia, 18 patients with leukoplakia and normal oral mucosa of 18 cases of mucosal squamous cell MMP-9 and TIMP-1 expression was semi-quantitative analysis. Results: leukoplakia. Leukoplakia MMP-9, TIMP-l expression were higher than normal oral mucosa (P <0.05). Expression of MMP-9 gradually increased, TIMP-1 expression of descending order. Conclusion: MM P-9 in oral leukoplakia may play an important role in the development of its activity by the T IM P-1's negative regulation.
【Key words】 leukoplakia; matrix metalloproteinase -9; matrix metalloproteinase inhibitor -1; immunohistochemistry; leukoplakia
【中图分类号】R46+2【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)03-0021-01
口腔粘膜白斑是公认的癌前病变，其癌变率约在3-5%左右。发病机制尚不十分清楚。已有研究表明，多种蛋白酶及其抑制剂在肿瘤的生长、浸润和转移过程中起重要作用。基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9， MMP-9)通过降解基膜中的层粘连蛋白、 Ⅳ型胶原等成分， 破坏基膜的完整性， 并因此被认为在恶性肿瘤的浸润转移中扮演重要角色，MMP- 9的活性受基质金属蛋白酶抑制剂-1 (tissue inhibitor of metalloprot einase -1，TIMP-1)的负性调控。口腔鳞状细胞癌( 鳞癌)MMP-9及TIMP-1的表达相关已见报道[1]。口腔粘膜白斑中MMP-9及TIMP-1的表达如何，罕见报道。本研究采用MMP-9及TIMP-1单克隆抗体检测白斑组织 50例。白斑癌变组织18例。研究MMP-9及TIMP-1与白斑癌变过程之间的关系。
1 材料与方法
1.1 材料:2001年3月~2009年3月经本院病理确诊的口腔粘膜白斑患者 50例，其中男性32例，女性l 8 例 ，年龄最大68岁， 最小37岁。在口腔粘膜白斑的基础上长期追踪后发现鳞癌的患者 1 7例，其中男性1l例，女性6例，年龄最大 6 8岁，最小49岁。人正常口腔粘膜组织 1 8例为对照组。取病变组织及正常口腔粘膜组织由病理科制成蜡块备用。
1.2 方法 采用免疫组化SP方法对18例正常口腔粘膜标本，50例口腔粘膜白斑标本，18例口腔白斑癌变标本进行检测试剂MMP-9，TIMP-1鼠单克隆抗体为一抗，工作浓度分别为1：80，1：100；SP试剂盒(包括生物素标记的第二抗体、第二抗体非免疫性山羊正常封闭血清、SP溶液、复合消化液等)、胰酶、DAB显色剂(二氨基联苯胺)购自Zymed公司，双氧水、中性甲醛均购自北京鼎国生物公司。用磷酸盐缓冲液代替一抗作为空白对照，SP法染色MMP -9，TIMP-1。具体操作按说明书进行，6μm石蜡切片常规脱蜡水化,由胰酶消化15min修复抗原,加50μL 过氧化物酶阻断液室温15min,加50μL非免疫性山羊血清室温10min,分别加一抗(MMP-9，TIMP-1鼠单克隆抗体)室温2h,加二抗室温10min,加链霉亲和素-过氧化物酶室温10min后二氨基联苯胺显色,苏木素轻染,脱水,透明,封片 ......
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