RH阴性血型抗体检测的研讨
凡是人体血液红细胞上有Rh凝集原者，为Rh阳性，反之为阴性。随着对Rh血型的不断研究，认为Rh血型系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血型系统。Rh血型的发现，对更加科学地指导输血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊断和维护母婴健康，都有非常重要的作用。Rh血型抗体是除ABO血型系统以外最具临床意义的红细胞血型抗体, 常引起免疫溶血性输血反应(HTR)及新生儿溶血病(HDN), 调查Rh血型抗体的检出率及特异性分布情况, 了解Rh血型抗体产生的规律, 对预防HTR及HDN具有重要的临床意义。研讨如下：
1 材料和方法
1.1 材料：选取在我院就诊的手术患者、 需要或预备输血的非手术患者、 孕妇、 部分新生儿及健康体检者共137例，其中男性77例，女性60例。年龄2~65岁，平均37岁。
1.2 方法：
1.2.1 红细胞血型不规则抗体的筛选：选取被检测者抗凝血标本3 mL，3000 r/min离心5 min后，采用微柱凝胶抗球蛋白技术，使被检测者血浆与筛检红细胞反应，筛查红细胞血型不规则抗体。被检测者血浆与3人份筛检红细胞中任何1、 2人份或3人份有凝集者为阳性，与3人份筛检红细胞均无凝集者为阴性。
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1.2.2 红细胞血型不规则抗体的特异性鉴定：将红细胞血型不规则抗体筛选结果为阳性研究对象的血浆，采用微柱凝胶抗球蛋白技术分别与由10人份O型红细胞组成的谱红细胞及自身红细胞(均为1%)反应。与谱红细胞中1至数人份凝集，与自身红细胞不凝集者为特异性抗体，并根据与谱红细胞的反应格局判定抗体的特异性。
1.2.3 Rh血型抗体免疫球蛋白类型的鉴定：取检出Rh血型抗体者的血浆0.2 mL加入等量0.2mol/L2Me后密封，37℃孵育30 min后用生理盐水倍比稀释，采用微柱凝胶抗球蛋白技术与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应，效价与2 Me处理前无变化者为IgG类抗体，效价与2 Me处理前有所降低、 但仍有反应者为IgG+IgM抗体，2 Me处理后与具有相应血型抗原的红细胞无反应者为IgM类抗体。
1.2.4 Rh血型抗体37℃反应性的鉴定：采用盐水法、 试管间接抗球蛋白试验2种方法分别使被检者血浆与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应，只要其中任何一种方法在37℃有凝集即可判断为37℃有反应的抗体。
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1.2.5 Rh血型抗体效价测定：取检出Rh血型抗体者的血浆用生理盐水倍比稀释后，采用微柱凝胶抗球蛋白试验，与具有抗体对应的Rh血型抗原的红细胞反应以检测其效价。
1.2.6 检出Rh血型抗体的新生儿血型血清学试验：对检出Rh血型抗体的新生儿，鉴定Rh血型、 做红细胞直接抗球蛋白试验(DAT)及红细胞放散试验，并鉴定放散液中的抗体及其特异性。
2 结果
经过我院的检测后，得到了如下结果：
2.1 Rh血型抗体的检出情况：被检测患者137例，检出Rh血型抗体52例，其中男性33例，女性19例。检出的52例Rh血型抗体阳性者中44例为成人，8例为出生1 d的新生儿。
2.2 Rh血型抗体的特异性分布：检出52例Rh血型抗体的特异性分布为，抗E2者34例、 抗D者8例、 抗cE者5例、 抗c者4例、 抗C者1例。
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3 讨论
Rh血型系统是已发现的29个人类红细胞血型系统中最具遗传多态性的红细胞血型系统，所表达的血型抗原多达55种， 其中Rh(D)抗原性最强，其次为Rh(E)、 Rh(C)、 Rh(c)、 Rh(e)等，因输血或妊娠等同种免疫易产生相应同种抗体，再次Rh血型不相容输血或妊娠可引起严重的HTR及HDN。在临床输血中Rh血型相容性的意义仅次于ABO血型， 而由于Rh血型抗原表位是多肽， 在胎儿出生时已发育成熟，与相应的IgG抗体亲和力较强， 严重的HDN病例多由Rh血型抗体引起，在HDN的发病方面， Rh血型抗体较ABO血型抗体更为重要。因此，调查Rh血型抗体的检出率及特异性分布情况，了解Rh血型抗体产生的规律，对预防HTR及HDN具有重要的临床意义。
红细胞血型抗体的主要临床意义在于是否可引起HTR及HDN，只要37℃可与相应抗原反应的血型抗体(IgM类或IgG类)都可引起HTR， 而只有37℃可与相应抗原反应的IgG类抗体才可引起HDN。除血型抗体的Ig类型及37℃反应性外，红细胞血型抗体的效价与临床意义也密切相关，抗体效价越高致敏红细胞的能力越强，其导致HTR及HDN的程度也越严重。近些年来我国实行了Rh(D)相容性输血,，绝大多数Rh(D)阴性受血者都能接受Rh(D)阴性血的输注，因输血所致同种免疫性抗D越来越少。另一方面，我国实行计划生育政策，育龄妇女的平均妊娠次数减少也可能是Rh血型抗体检出率较低的原因之一。总之RH阴性血型抗体方面的研究早已经受到了重视，而且在临床上也有很大的意义，值得我们进行深入的研究与探讨。
参考文献
[1] 杨世明 潘晓莉Rh(D)抗原及Rh血型免疫性抗体检测的分析 细胞与分子免疫学杂志 2004, 20(2)
[2] 吴远军 刘兴玲 孕妇IgG类红细胞血型不规则抗体对早期诊断Non ABO HDN的意义中国生物制品学杂志 2007, 20(6): 406-408
作者单位：158100 鸡西市中心血站, 百拇医药(曲永贵)
1 材料和方法
1.1 材料：选取在我院就诊的手术患者、 需要或预备输血的非手术患者、 孕妇、 部分新生儿及健康体检者共137例，其中男性77例，女性60例。年龄2~65岁，平均37岁。
1.2 方法：
1.2.1 红细胞血型不规则抗体的筛选：选取被检测者抗凝血标本3 mL，3000 r/min离心5 min后，采用微柱凝胶抗球蛋白技术，使被检测者血浆与筛检红细胞反应，筛查红细胞血型不规则抗体。被检测者血浆与3人份筛检红细胞中任何1、 2人份或3人份有凝集者为阳性，与3人份筛检红细胞均无凝集者为阴性。
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1.2.2 红细胞血型不规则抗体的特异性鉴定：将红细胞血型不规则抗体筛选结果为阳性研究对象的血浆，采用微柱凝胶抗球蛋白技术分别与由10人份O型红细胞组成的谱红细胞及自身红细胞(均为1%)反应。与谱红细胞中1至数人份凝集，与自身红细胞不凝集者为特异性抗体，并根据与谱红细胞的反应格局判定抗体的特异性。
1.2.3 Rh血型抗体免疫球蛋白类型的鉴定：取检出Rh血型抗体者的血浆0.2 mL加入等量0.2mol/L2Me后密封，37℃孵育30 min后用生理盐水倍比稀释，采用微柱凝胶抗球蛋白技术与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应，效价与2 Me处理前无变化者为IgG类抗体，效价与2 Me处理前有所降低、 但仍有反应者为IgG+IgM抗体，2 Me处理后与具有相应血型抗原的红细胞无反应者为IgM类抗体。
1.2.4 Rh血型抗体37℃反应性的鉴定：采用盐水法、 试管间接抗球蛋白试验2种方法分别使被检者血浆与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应，只要其中任何一种方法在37℃有凝集即可判断为37℃有反应的抗体。
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1.2.5 Rh血型抗体效价测定：取检出Rh血型抗体者的血浆用生理盐水倍比稀释后，采用微柱凝胶抗球蛋白试验，与具有抗体对应的Rh血型抗原的红细胞反应以检测其效价。
1.2.6 检出Rh血型抗体的新生儿血型血清学试验：对检出Rh血型抗体的新生儿，鉴定Rh血型、 做红细胞直接抗球蛋白试验(DAT)及红细胞放散试验，并鉴定放散液中的抗体及其特异性。
2 结果
经过我院的检测后，得到了如下结果：
2.1 Rh血型抗体的检出情况：被检测患者137例，检出Rh血型抗体52例，其中男性33例，女性19例。检出的52例Rh血型抗体阳性者中44例为成人，8例为出生1 d的新生儿。
2.2 Rh血型抗体的特异性分布：检出52例Rh血型抗体的特异性分布为，抗E2者34例、 抗D者8例、 抗cE者5例、 抗c者4例、 抗C者1例。
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3 讨论
Rh血型系统是已发现的29个人类红细胞血型系统中最具遗传多态性的红细胞血型系统，所表达的血型抗原多达55种， 其中Rh(D)抗原性最强，其次为Rh(E)、 Rh(C)、 Rh(c)、 Rh(e)等，因输血或妊娠等同种免疫易产生相应同种抗体，再次Rh血型不相容输血或妊娠可引起严重的HTR及HDN。在临床输血中Rh血型相容性的意义仅次于ABO血型， 而由于Rh血型抗原表位是多肽， 在胎儿出生时已发育成熟，与相应的IgG抗体亲和力较强， 严重的HDN病例多由Rh血型抗体引起，在HDN的发病方面， Rh血型抗体较ABO血型抗体更为重要。因此，调查Rh血型抗体的检出率及特异性分布情况，了解Rh血型抗体产生的规律，对预防HTR及HDN具有重要的临床意义。
红细胞血型抗体的主要临床意义在于是否可引起HTR及HDN，只要37℃可与相应抗原反应的血型抗体(IgM类或IgG类)都可引起HTR， 而只有37℃可与相应抗原反应的IgG类抗体才可引起HDN。除血型抗体的Ig类型及37℃反应性外，红细胞血型抗体的效价与临床意义也密切相关，抗体效价越高致敏红细胞的能力越强，其导致HTR及HDN的程度也越严重。近些年来我国实行了Rh(D)相容性输血,，绝大多数Rh(D)阴性受血者都能接受Rh(D)阴性血的输注，因输血所致同种免疫性抗D越来越少。另一方面，我国实行计划生育政策，育龄妇女的平均妊娠次数减少也可能是Rh血型抗体检出率较低的原因之一。总之RH阴性血型抗体方面的研究早已经受到了重视，而且在临床上也有很大的意义，值得我们进行深入的研究与探讨。
参考文献
[1] 杨世明 潘晓莉Rh(D)抗原及Rh血型免疫性抗体检测的分析 细胞与分子免疫学杂志 2004, 20(2)
[2] 吴远军 刘兴玲 孕妇IgG类红细胞血型不规则抗体对早期诊断Non ABO HDN的意义中国生物制品学杂志 2007, 20(6): 406-408
作者单位：158100 鸡西市中心血站, 百拇医药(曲永贵)