补肾调肝法对骨关节炎软骨和滑膜诱导型一氧化氮合酶的影响(1)
 |
| 第1页 |
参见附件。
【摘要】 目的：研究补肾调肝法对骨关节炎软骨和滑膜诱导型一氧化氮合酶的影响。方法：通过切断膝关节前交叉韧带和内侧副韧带造成膝OA模型。将24只普通级新西兰兔随机分为A组(正常组)、B组(模型组)、C组(活血法组)、D组(补肾调肝法组)。给药4周后处死实验兔，行关节腔大体观察，关节液NO含量检测，滑膜、关节软骨组织学观察，滑膜、关节软骨iNOS含量检测，观察肝肾亏虚型与正常软骨和滑膜标本对补肾调肝治法的应答的不同。结果：D组关节腔大体观察与C组比较，差异无显著性(P>0.05)；D组关节液NO含量检测与C组比较，差异显著(P<0.05)；D组滑膜、关节软骨组织学观察评分与C组比较，差异显著(P<0.05)；D组滑膜组织及软骨中iNOS含量与C组比较有显著性差异(P<0.05)。结论：补肾调肝法通过抑制骨关节炎NO及iNOS的表达，可降低NO及iNOS含量，减少软骨细胞凋亡，促进软骨基质合成及抑制其分解，可抑制滑膜炎症，延缓关节软骨退变，促进了关节软骨的修复。
【关键词】补肾调肝法；中医治法；软骨和滑膜；一氧化氮合酶
【中图分类号】R352 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)05-0301-02
骨关节炎(Osteoarthritis，OA)是各种力学和生物因素破坏关节软骨、细胞外基质和软骨下骨的退变及合成稳定性的结果。临床上以关节疼痛、或有肿胀、活动受限和关节畸形等症状为主。现代医学对大部分患者多采用非手术治疗，包括理疗、支具、矫形器、助行用具、非甾体类抗炎药物和中医药治疗。仅对少部份患者采用关节镜冲洗清理术、截骨术、关节融合或关节置换术等。目前临床应用中医药治疗骨关节炎取得了较好疗效[1-3]。本研究我们在兔KOA动物模型上，观察了关节液一氧化氮(NO)含量、滑膜和软骨病变计分、软骨和滑膜iNOS含量，以探讨补肾调肝法对OA的治疗作用及其机制，为临床应用提供依据。
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组：选择成年健康普通级新西兰兔24只(由广州中医药大学实验动物中心提供，动物合格证编号：0055773)，体重1.8～2.3kg。按随机数字表法随机分成4组：A组(正常组)、B组(模型组)、C组(活血法)、D组(补肾调肝法)，每组6只，分别编号。
1.2 造模方法：手术切断膝关节前后交叉韧带和内侧副韧带制造兔膝骨关节炎软骨退行性变模型。采用化学纯氨基甲酸乙酯麻醉，用0.9%氯化钠溶液将其配成20%的溶液，按1 g/Kg体重比例作耳缘静脉注射。麻醉后，剪除右后肢膝关节周围毛发，常规消毒，髌旁内侧切口长约3 cm，切开关节囊，将髌骨向外翻转，切断前交叉韧带和内侧副韧带，止血，缝合关节囊及皮肤。术后3天行肌注青霉素40万U/d，以预防感染。A组不手术。4周以后喂服药物1次/日，连续给药4周。A组与B组喂服与D组中药等量的淀粉颗粒1次/日。
1.3 药物治疗与标本采集：药物组与剂量：①C组：当归10g，赤芍9g，川芎6g，红花3g，桃仁9g，牛膝10g，枳壳10g，地龙6g；②D组：独活9g，寄生6g，杜仲6g，牛膝6g，细辛6g，秦艽6g，茯苓6g，肉桂心6g，防风6g，川芎6g，种洋参6g，白芍6g，熟地6g，甘草6g。为提高实验结果的重复性，使用由江阴天江药业有限公司生产的单味中药浓缩颗粒剂组配，并且要求同一批号。用药剂量按Meeh-Rubner公式A(体表面积)=K(系数)·W(体重g)2/3·10-4体表面积换算，用适量温开水将中药浓缩颗粒剂搅拌均匀后灌胃。动物分笼标准饲养。于手术后8周予过量麻醉处死，处死当天不给药。处死后每只动物依次打开关节腔行大体观察。用锐利刀片切取内侧滑膜和股骨内髁下面全层关节软骨，留作实验标本。将取出的滑膜、软骨标本分成两等份。
1.4 观测指标：包括关节腔大体观察；组织学观察；关节液NO含量测定；滑膜、软骨iNOS检测。
1.5 统计学方法：本研究的数据以 X±s表示。采用SPSS16.0统计软件进行数据录入和统计处理，显著性比较采用t检验处理。
2 实验结果
表1 关节液NO含量、滑膜和软骨病变计分、软骨和滑膜iNOS含量(X±s)
组别关节液NO(μmol·L)滑膜病变计分软骨病变计分滑膜iNOS含量(μmol·L)软骨iNOS含量(μmol·L)
A54.07±4.231.19±0.150.89±0.100.9±0.070.17±0.03
B82.68±7.281.97±0.111.56±0.141.80±0.120.50±0.04
C63.90±6.461.57±0.121.26±0.091.35±0.100.37±0.06
D48.27±6.201.21±0.100.94±0.150.75±0.320.23±0.06
①关节液NO含量：B组与A组相比较，P<0.05；C组、D组与A组相比较，P>0.05；C组、D组与B组相比较，P<0.05；D组与C组相比较，P<0.05；②滑膜病变计分：B组与A组相比较，P<0.05；C组与A组相比较，P<0.05；C组与B组相比较，P<0.05；D组与A组相比较，P>0.05；D组与B组，C组相比较，P<0.05；③软骨病变计分：B组与A组比较，P<0.05；C组与A组相比较，P<0.05；C组与B组相比较，P<0.05；D组与A组相比较，P>0.05；D组与B组、C组相比较，P<0.05；④滑膜iNOS含量和软骨iNOS含量：B组与A组相比较，P<0.05；C组与A组相比较，P<0.05；C组与B组相比较，P<0.05，D组与A组相比较，P>0.05；D组与B组、C组相比较，P<0.05；n=6。
2.1 滑膜和软骨大体观察A组兔膝关节软骨外观呈蓝白色，色泽明亮，无裂纹及软化缺损，触之较硬；关节液量较少，质地清辙透明。B组关节软骨明显失去原有光泽、发黄、色泽暗淡、软骨触之较软，尤以股骨外髁为著，可见皲裂甚至缺损，关节表面欠规则，且关节边缘有骨赘形成及纤维性粘连，滑膜存在不同程度增生；关节液量增多，且呈泡沫状、混浊。对照、治疗两组均可见关节软骨外观呈白色，欠光滑，股骨髁软骨触之变软，有的可见裂纹，滑膜轻度增生，关节液较A组稍多 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(4956kb)。