红斑狼疮的实验室检测进展
【关键词】红斑狼疮；实验室检测；自身抗体；小分子RNA
【中图分类号】R856 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)07-0268-02
系统性红斑狼疮(SLE)是常见的自身免疫性疾病，常累及多系统和器官的损伤，血清中出现多种自身抗体。近年来，随着免疫学和分子生物学技术的发展，SLE新的生物标志物被发现，SLE的诊断技术也得到了发展。对SLE生物标志物的检测有助于了解疾病的易感性、预测复发、临床亚型分类。本文综述SLE的实验室检测技术的研究进展，为SLE的早期诊断和治疗提供综合思路。
1 SLE的常规实验室检测
1.1血常规SLE患者常伴有血液系统异常现象，其原因是由于患者血清存在抗白细胞抗体和免疫抑制。曾林涓[1]等通过对84例SLE患者进行血常规检测，发现77例患者存在血象异常，患者主要表现为白细胞减少，轻、中度贫血和血小板减少。所以当患者以血液系统症状就诊时，临床医生应提高警惕性，可进行与SLE 相关的检查。
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1.2尿常规血尿、尿蛋白是风湿病肾脏损害最普遍的临床表现，50%~70%狼疮性肾炎伴有不同程度蛋白尿和血尿。大分子量尿蛋白反应肾小球滤除情况，小分子量尿蛋白反应近肾端肾小管吸收功能异常[2]。
1.3 血清蛋白分析大多数SLE患者γ球蛋白升高，清/球蛋白比例降低，血清补体降低，其中以G3最敏感。近年来逐渐发展起来的血清蛋白指纹图谱技术对检测SLE患者血清蛋白提供了良好的检测手段， 宋卫青[3]等运用SELDI-TOF-MS技术建立了SLE患者血清蛋白质指纹图谱筛选模型，发现SLE患者与非SLE患者11种蛋白质表达存在差异。黄卓春[4]等联用弱阳离子磁珠与蛋白质芯片阅读仪绘制SLE患者血清蛋白质指纹图谱，发现28个蛋白在SLE患者表达增高，32个蛋白峰表达降低，提示这些蛋白可能成为SLE特异标志物。
2抗核抗体检测
由于SLE患者体液免疫和细胞免疫功能异常，体内存在多种自身抗体，称为抗核抗体(ANA)。ANA包括对细胞核内三大抗原性物质起反应的抗体：抗DAN抗体、抗组蛋白抗体和抗非组蛋白抗体。在这三种抗体中，有不少已成为诊断SLE的血清标志物抗体。
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2.1抗DNA抗体抗DNA抗体主要有2中，抗ds-DNA抗体和抗ss-DNA抗体。抗ds-DNA是SLE患者的标志性抗体，目前主要采用Farr试验来检测，特异性强、敏感性高。其他常用方法有放射免疫分析法、酶联免疫吸附法、胶体金法。而抗ss-DNA一般采用血凝法检测，抗ss-DNA抗体无特异性，可见于多种自身免疫病和感染后。
2.2抗组蛋白抗体 该抗体对于药物性SLE非常重要，史晓敏[5]等用ELISA试验检测显示100%的药物性SLE患者体内存在抗组蛋白抗体。
2.3抗ENA抗体目前用于检测抗ENA抗体的方法有CIE法、免疫蛋白印迹法等。CIE法通过抗原抗体在琼脂糖中扩散相遇形成沉淀线来检测抗Sm抗体、抗U1RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体。而免疫蛋白印迹法敏感性和特异性均较高，能检测抗Sm抗体、抗U1RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体和抗核糖体抗体等，为多种易混淆的自身免疫疾病的临床诊断和鉴别提供了实验室检测依据。
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2.4抗核小体抗体近年来研究认为抗核小体抗体是SLE发病过程中的一种主要自身免疫原和多种抗核抗体出现的根源，胡学芳[6]等通过研究表明AnuA对SLE的诊断价值由于Sm抗体和抗dsDNA抗体。
3抗膜抗体检测
目前实验室常用的检测SLE的抗膜抗体检测有抗磷脂抗体、抗红细胞抗体、抗血小板抗体、抗嗜中性粒细胞胞浆抗体。以上抗膜抗体的检测可用酶联免疫吸附法、免疫荧光法和coombs's 试验进行检测。
4 microRNAs检测
microRNAs(miRNAs)是近年来发现的一类长度约18~25核苷酸的内源性非编码小分子RNA，普遍存在于动植物体内，具有高度进化保守性。目前已发现miRNAs参与生命过程的一系列重要进程。Dai等[7]利用microarray技术发现SLE患者发现7种miRNAs下调，9种上调，外周血单个核细胞检测发现miRNA-189高表达，陈士伟[8]等应用RT-PCR技术发现SLE患者血浆中miRNA-189明显高于非SLE患者，另有研究表明SLE患者外周血白细胞miRNA-164a表达不足。可见miRNAs可作为一个SLE的潜在诊断标志物。
, 百拇医药
随着分子生物学和现代技术的发展，相信越来越多的分子标志物会被发现，更多的实验室检测SLE的方法将会被运用到临床诊断中。
参考文献
[1] 曾林涓,李学刚,钟淑萍,等.初诊系统性红斑狼疮患者血液系统异常的临床分析[J].岭南急诊医学杂志, 2011,16(01):27-29
[2] 芦建华,李文歌,邹古明,等.70例男性系统性红斑狼疮患者临床及肾脏病理分析[J].中国中西医结合肾病杂志,2010,11(10):888-890
[3] 宋卫青, 李化会, 陈华波,等.应用SELDI-TOF-MS技术建立SLE患者血清蛋白质指纹图谱筛选模型[J].山东医药, 2009,49(33):60-62
[4] 黄卓春, 石运莹, 蔡蓓,等.运用蛋白质指纹图谱技术建立系统性红斑狼疮诊断模式的研究[J].四川大学学报(医学版), 2009,40(03):499-503
, 百拇医药
[5] 史晓敏,冯珍如,隋宝环.酶联免疫吸附试验检测人血清抗双链DNA抗体在系统性红斑狼疮诊断中的性能评估[J].Chinese General Practice,2011,4(1B):167-170
[6] 胡学芳,李小峰,许珂,等.抗核小体抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值[J].中华检验医学杂志,2005,25(4):407-408
[7]Dai Y, Huang YS, Tang M, et a1.Mieroarray analysis of microRNA expression in peripheral blood cells of systemic lupus erythematosus patients [J]. Lupus, 2007, 16(12):939-946.
[8] 陈士伟,沈茜. 循环miR-189对系统性红斑狼疮的诊断意义和价值[J]. 实用医学杂志,2011,27(8):1482-1484
作者单位：150036 黑龙江护理高等专科学校1
150036 黑龙江省医院实验诊断部2, 百拇医药(赵秀梅 尹燕双 张兰萍)
【中图分类号】R856 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)07-0268-02
系统性红斑狼疮(SLE)是常见的自身免疫性疾病，常累及多系统和器官的损伤，血清中出现多种自身抗体。近年来，随着免疫学和分子生物学技术的发展，SLE新的生物标志物被发现，SLE的诊断技术也得到了发展。对SLE生物标志物的检测有助于了解疾病的易感性、预测复发、临床亚型分类。本文综述SLE的实验室检测技术的研究进展，为SLE的早期诊断和治疗提供综合思路。
1 SLE的常规实验室检测
1.1血常规SLE患者常伴有血液系统异常现象，其原因是由于患者血清存在抗白细胞抗体和免疫抑制。曾林涓[1]等通过对84例SLE患者进行血常规检测，发现77例患者存在血象异常，患者主要表现为白细胞减少，轻、中度贫血和血小板减少。所以当患者以血液系统症状就诊时，临床医生应提高警惕性，可进行与SLE 相关的检查。
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1.2尿常规血尿、尿蛋白是风湿病肾脏损害最普遍的临床表现，50%~70%狼疮性肾炎伴有不同程度蛋白尿和血尿。大分子量尿蛋白反应肾小球滤除情况，小分子量尿蛋白反应近肾端肾小管吸收功能异常[2]。
1.3 血清蛋白分析大多数SLE患者γ球蛋白升高，清/球蛋白比例降低，血清补体降低，其中以G3最敏感。近年来逐渐发展起来的血清蛋白指纹图谱技术对检测SLE患者血清蛋白提供了良好的检测手段， 宋卫青[3]等运用SELDI-TOF-MS技术建立了SLE患者血清蛋白质指纹图谱筛选模型，发现SLE患者与非SLE患者11种蛋白质表达存在差异。黄卓春[4]等联用弱阳离子磁珠与蛋白质芯片阅读仪绘制SLE患者血清蛋白质指纹图谱，发现28个蛋白在SLE患者表达增高，32个蛋白峰表达降低，提示这些蛋白可能成为SLE特异标志物。
2抗核抗体检测
由于SLE患者体液免疫和细胞免疫功能异常，体内存在多种自身抗体，称为抗核抗体(ANA)。ANA包括对细胞核内三大抗原性物质起反应的抗体：抗DAN抗体、抗组蛋白抗体和抗非组蛋白抗体。在这三种抗体中，有不少已成为诊断SLE的血清标志物抗体。
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2.1抗DNA抗体抗DNA抗体主要有2中，抗ds-DNA抗体和抗ss-DNA抗体。抗ds-DNA是SLE患者的标志性抗体，目前主要采用Farr试验来检测，特异性强、敏感性高。其他常用方法有放射免疫分析法、酶联免疫吸附法、胶体金法。而抗ss-DNA一般采用血凝法检测，抗ss-DNA抗体无特异性，可见于多种自身免疫病和感染后。
2.2抗组蛋白抗体 该抗体对于药物性SLE非常重要，史晓敏[5]等用ELISA试验检测显示100%的药物性SLE患者体内存在抗组蛋白抗体。
2.3抗ENA抗体目前用于检测抗ENA抗体的方法有CIE法、免疫蛋白印迹法等。CIE法通过抗原抗体在琼脂糖中扩散相遇形成沉淀线来检测抗Sm抗体、抗U1RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体。而免疫蛋白印迹法敏感性和特异性均较高，能检测抗Sm抗体、抗U1RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体和抗核糖体抗体等，为多种易混淆的自身免疫疾病的临床诊断和鉴别提供了实验室检测依据。
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2.4抗核小体抗体近年来研究认为抗核小体抗体是SLE发病过程中的一种主要自身免疫原和多种抗核抗体出现的根源，胡学芳[6]等通过研究表明AnuA对SLE的诊断价值由于Sm抗体和抗dsDNA抗体。
3抗膜抗体检测
目前实验室常用的检测SLE的抗膜抗体检测有抗磷脂抗体、抗红细胞抗体、抗血小板抗体、抗嗜中性粒细胞胞浆抗体。以上抗膜抗体的检测可用酶联免疫吸附法、免疫荧光法和coombs's 试验进行检测。
4 microRNAs检测
microRNAs(miRNAs)是近年来发现的一类长度约18~25核苷酸的内源性非编码小分子RNA，普遍存在于动植物体内，具有高度进化保守性。目前已发现miRNAs参与生命过程的一系列重要进程。Dai等[7]利用microarray技术发现SLE患者发现7种miRNAs下调，9种上调，外周血单个核细胞检测发现miRNA-189高表达，陈士伟[8]等应用RT-PCR技术发现SLE患者血浆中miRNA-189明显高于非SLE患者，另有研究表明SLE患者外周血白细胞miRNA-164a表达不足。可见miRNAs可作为一个SLE的潜在诊断标志物。
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随着分子生物学和现代技术的发展，相信越来越多的分子标志物会被发现，更多的实验室检测SLE的方法将会被运用到临床诊断中。
参考文献
[1] 曾林涓,李学刚,钟淑萍,等.初诊系统性红斑狼疮患者血液系统异常的临床分析[J].岭南急诊医学杂志, 2011,16(01):27-29
[2] 芦建华,李文歌,邹古明,等.70例男性系统性红斑狼疮患者临床及肾脏病理分析[J].中国中西医结合肾病杂志,2010,11(10):888-890
[3] 宋卫青, 李化会, 陈华波,等.应用SELDI-TOF-MS技术建立SLE患者血清蛋白质指纹图谱筛选模型[J].山东医药, 2009,49(33):60-62
[4] 黄卓春, 石运莹, 蔡蓓,等.运用蛋白质指纹图谱技术建立系统性红斑狼疮诊断模式的研究[J].四川大学学报(医学版), 2009,40(03):499-503
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[5] 史晓敏,冯珍如,隋宝环.酶联免疫吸附试验检测人血清抗双链DNA抗体在系统性红斑狼疮诊断中的性能评估[J].Chinese General Practice,2011,4(1B):167-170
[6] 胡学芳,李小峰,许珂,等.抗核小体抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值[J].中华检验医学杂志,2005,25(4):407-408
[7]Dai Y, Huang YS, Tang M, et a1.Mieroarray analysis of microRNA expression in peripheral blood cells of systemic lupus erythematosus patients [J]. Lupus, 2007, 16(12):939-946.
[8] 陈士伟,沈茜. 循环miR-189对系统性红斑狼疮的诊断意义和价值[J]. 实用医学杂志,2011,27(8):1482-1484
作者单位：150036 黑龙江护理高等专科学校1
150036 黑龙江省医院实验诊断部2, 百拇医药(赵秀梅 尹燕双 张兰萍)