药理效应法评价胃康漂浮缓释片的提取工艺
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【摘要】目的：本课题依据左金丸具有镇痛这一药理作用[1]，优选左金丸的最佳提取溶媒。方法：以8倍量水为溶媒煎煮提取药材(黄连:吴茱萸=6:1)2h，提取液滤过，制成水煎液；以65%乙醇为溶媒同法提取药材(黄连:吴茱萸=6:1)，提取液回收乙醇至无醇味，制成乙醇提取液；将上述比例的药材粉碎，过100目筛，加水制成混悬液。各组小鼠连续灌胃上述三种药液5d，末次给药1h后，以热板法[2]考察三种药液给药后的镇痛作用。结果：各组均能延长小鼠的痛阈，其中醇提液痛阈提高百分率最大。结论：优选的最佳提取溶媒为65%乙醇。
【关键词】左金丸；热板镇痛法；痛阈
【中图分类号】R156.3【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)12-0434-02
左金丸收载于《中华人民共和国药典》2010版一部中，剂型为水丸，由黄连和吴茱萸两味药(6:1)组成。主治肝火犯胃，脘胁疼痛，口苦嘈杂，呕吐酸水，不喜热饮等症[3]。水丸作为一种传统剂型，服用剂量大，且生物利用度相对较低。故将其制成胃内漂浮缓释片[4]，并进行二次开发。
1材料
1.1实验动物：
昆明种SPF级小鼠30只，体重20±2g，雌性，由甘肃中医学院实验动物中心提供。
食固体饲料，食水自由，并观察进食、饮水、活动、大小便情况，均确认为健康后以备实验使用。实验设施使用证SYXK(甘)2004～0006，实验动物质量合格证SCXK(甘)2004～0006。动物颗粒饲料由北京科奥协力饲料有限公司提供。
1.2药品与试剂：
黄连(购于兰州黄河药市，批号：20100315)，经甘肃中医学院附属医院药剂科杨锡仓主任药师鉴定为毛茛科Ranunculaceae植物黄连CoptischinensisFranch的干燥根茎，吴茱萸(购于兰州黄河药市，批号：20100315)，经甘肃中医学院附属医院药剂科杨锡仓主任药师鉴定为芸香科植物吴茱萸Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.的干燥近成熟果实，乙醇(分析纯，天津市得思化学试剂有限公司，批号：20090212)。
1.3仪器与设备：RCY-2痛阈测定仪(成都泰盟科技公司，编号：20060204)；AR2140电子天平(上海奥豪斯公司)；DZHW调温电热套(北京永光明仪器公司)；CXT-64-01电动离心机(北京医疗仪器厂)；JYT-20A药物天平(上海医用仪器厂)；HH-601恒温水浴锅(金坛市恒丰仪器厂)；万用电炉(北科伟永兴公司)。
2方法
2.1左金丸供试品的制备
2.1.1水煎提取物的制备：
称取黄连12g，吴茱萸2g，粉碎成粗粉，过二号筛，置250ml圆底烧瓶中，加112ml蒸馏水，于电热套中煎煮提取2h，提取液滤过，滤液定容至200ml，制成水煎液，备用。
2.1.2乙醇提取物的制备：
称取黄连12g，吴茱萸2g，粉碎成粗粉，过二号筛，置250ml圆底烧瓶中，加112ml65%乙醇，于电热套中回流提取2h，提取液滤过，滤液于恒温水浴锅上蒸至无醇味，加水定容至200ml，制成醇提液，备用。
2.1.3药粉混悬液的制备：
称取黄连12g，吴茱萸2g，粉碎成细粉过100目筛，加水溶解并定容至200ml，制成药粉混悬液，备用。
2.2小鼠热板镇痛实验
2.2.1预选实验动物：
调节水浴锅，将热板的温度调节为(55±0.5)℃，置小鼠于热板上，测定各小鼠正常的痛阈(即痛反应潜伏期，指小鼠接触热板至舔足的时间)[5]。以小鼠舔后足或抬后足为观察指标，共测2次，每次间隔大于5min，以均值超过5s且不超过30s为合格，共筛选出30只雌性小鼠。
2.2.2分组与给药：
将筛出的30只小鼠称重标记，随机分为3组：1-10号为水煎液组，11-20号为65%乙醇提液组，21-30号为药粉混悬液组。水煎液组剂量0.2ml/10g、乙醇提取液组剂量0.2ml/10g、药粉混悬液组剂量0.2ml/10g。其中小鼠体重每两天测定一次。各组灌胃给药，每天1次，共5d。
2.2.3给药后痛阈值测定：
末次给药1h后再测定痛阈，如果60s内无反应按60s记，并将小鼠取出以防烫伤。将结果记入表内。
2.3数据记录处理：
汇总各组实验结果，记表内，结果以(X±s表示。按所测痛阈平均值并依照下列公式分别计算各组痛阈提高百分率[6]。
痛阈提高百分率=用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值×100%
3结果
给药后与给药前比较，给药后左金丸各组提取物均能够明显延长小鼠的痛阈，说明各组提取物均有一定的镇痛作用。且水煎液组、乙醇提取液组、药粉混悬液组有显著性差异(P<0.05)。见下表。
4讨论 ......
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