尿液红细胞的检验方法及评价
尿液红细胞(BBC)检测是对肾和泌尿系统疾病的诊断和鉴别诊断,对病情严重程度、疗效和预后观察都有极为重要的价值。目前检测尿红细胞的方法有尿红细胞定性检测,尿红细胞定量检测,尿红细胞的形态鉴别。现将各种方法做一比较。
1 尿细胞的定性检测
1.1 干化学尿红细胞检查干化学尿液分析仪检测RBC是利用Hb具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解释放出氧(O),后者能氧化色原使其显色,它既可检测完整红细胞中的Hb,也可检测游离的Hb,且以后者更为敏感。当血管内溶血、肾病患者RBC在肾脏或泌尿道被破坏、尿比重过低或尿pH偏高等造成的RBC破坏所致的Hb尿,Diasys工作站法或UF-100法均难以检测出这些破坏了的RBC,而只能由干化学法BLD检测出来。同时,BLD测定干扰因素甚多,常见的是具有与Hb相同氧化色原作用的类过氧化酶性物质所导致的假阳性。尿中含有大量维生素C,易造成BLD假阴性。尿液里许多具有氧化作用的酶均可造成假阳性结果, 特别是在泌尿系感染中,大多数革兰阴性菌和某些革兰阳性菌可能释放过氧化物酶活性物质或本身为了代谢的需要,在繁殖过程中,合成触酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶,这些物质和酶在干化学法测定尿红细胞时,都能使试带中的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出游离氧,后者使色源呈色而出现假阳性。
1.2试管法为常量法,容易观察结果,过去联苯胺为常用的试剂,反应灵敏,结果鲜明,但因有致癌性,近来已属禁用范畴。
1.3 单克隆抗体免疫尿红细胞检查单克隆抗体免疫尿红细胞检测的原理:尿液中红细胞或血红蛋白与试剂中单克隆结合并显色,判断尿中有无细胞。是尿红细胞的鉴别诊断法,假阳性率低,但过于敏感,不适合常规尿红细胞的检测。
2 尿红细胞定量检查
2.1 显微镜尿红细胞定量检测该方法是当今肾泌尿系统疾病重要的诊断依据,也是规范尿液分析的重要内容,迄今为止尚无一种自动化仪器能代替镜检,其缺点是不能检出血红蛋白尿液,规范化沉渣镜检操作较为繁琐,为获得准确的试验结果要有高素质的工作人员和标准化的检验仪器。
2.1.1 11h尿沉渣计数 患者先排尿弃去,准确收集3h尿液于清洁干燥容器内送检,准确测量3h的尿量,取混合尿液10ml置刻度离心管内,1500r/min离心5min,用吸管吸弃上层尿液9ml,留下1ml混匀,吸取尿液1滴,注入血细胞计数板内,红细胞共数10个大格,计数血细胞数,红细胞数男性<3万/h,女性<4万/h。
2.1.2 尿沉渣镜检标准化检测尿液红细胞数 操作步骤取新鲜尿液10ml,离心(1500r/min)5min后,取0.2ml尿沉渣充盈到标准化尿沉渣计数板内,计算出细胞数/μl 。
2.2 尿流式细胞仪检测尿中的红细胞数 其原理以激光散射强度、波幅、荧光强度、波幅等技术识别计数尿中红细胞数。优点是操作简单,快速自动进样,自动分析,便于质量控制,1min内可得出结果。重复性好、误差小、不受人为因素影响等。其缺点是尿液分析仪昂贵,干扰因素多,影响计数结果,因此仪器出现报警时必须作镜检分析,力求达到尿流式细胞仪,干化学与人工镜检互补,以提高尿红细胞的检测质量[1]。
3 鉴别尿液中细胞形态
新鲜尿中红细胞形态对鉴别肾小球源性和非肾小球源性血尿有重要价值。肾小球血尿多为变形细胞血尿,或以其为主的混合性血尿。非肾小球疾病的血尿,则多为均一性血尿[2]。
3.1 普通显微镜法 (1)非染色法,由于缺乏色泽对比和立体感,不易鉴别。(2)染色法(甲基绿色,结晶紫—沙黄染色,瑞氏染色)可增加形态鉴别特征。
3.2 相差显微镜法红细胞立体感强,易于鉴别。
3.3 尿液中有形成分分析如日本的SysmexuF-100,可将尿液中的成分作荧光染色后识别,如肾性血尿,红细胞的散射光分布在图形左侧,而非肾性血尿,红细胞数散射光分布在图象右侧。
综上所述,尿液红细胞检查包括定性方面的检测,定量方面的检测,红细胞的形态、鉴别,各有优点和不足,在实际应用中,应根据病情科学地选择不同的检测方法,提高尿液红细胞检测的质量,为临床提供可靠,准确的实验依据。
【参考文献】
[1] 蔡应木,林静华,焦晓阳.对全自动尿液沉渣分析仪检测结果的质量控制.中华医学检验杂志,2002,20:154.
[2]夏铵安,胡玉祥.卫生专业技术资格考试指导(临床医学检验).济南:山东大学出版社,2004:44., 百拇医药(林桂玲)
1 尿细胞的定性检测
1.1 干化学尿红细胞检查干化学尿液分析仪检测RBC是利用Hb具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解释放出氧(O),后者能氧化色原使其显色,它既可检测完整红细胞中的Hb,也可检测游离的Hb,且以后者更为敏感。当血管内溶血、肾病患者RBC在肾脏或泌尿道被破坏、尿比重过低或尿pH偏高等造成的RBC破坏所致的Hb尿,Diasys工作站法或UF-100法均难以检测出这些破坏了的RBC,而只能由干化学法BLD检测出来。同时,BLD测定干扰因素甚多,常见的是具有与Hb相同氧化色原作用的类过氧化酶性物质所导致的假阳性。尿中含有大量维生素C,易造成BLD假阴性。尿液里许多具有氧化作用的酶均可造成假阳性结果, 特别是在泌尿系感染中,大多数革兰阴性菌和某些革兰阳性菌可能释放过氧化物酶活性物质或本身为了代谢的需要,在繁殖过程中,合成触酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶,这些物质和酶在干化学法测定尿红细胞时,都能使试带中的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出游离氧,后者使色源呈色而出现假阳性。
1.2试管法为常量法,容易观察结果,过去联苯胺为常用的试剂,反应灵敏,结果鲜明,但因有致癌性,近来已属禁用范畴。
1.3 单克隆抗体免疫尿红细胞检查单克隆抗体免疫尿红细胞检测的原理:尿液中红细胞或血红蛋白与试剂中单克隆结合并显色,判断尿中有无细胞。是尿红细胞的鉴别诊断法,假阳性率低,但过于敏感,不适合常规尿红细胞的检测。
2 尿红细胞定量检查
2.1 显微镜尿红细胞定量检测该方法是当今肾泌尿系统疾病重要的诊断依据,也是规范尿液分析的重要内容,迄今为止尚无一种自动化仪器能代替镜检,其缺点是不能检出血红蛋白尿液,规范化沉渣镜检操作较为繁琐,为获得准确的试验结果要有高素质的工作人员和标准化的检验仪器。
2.1.1 11h尿沉渣计数 患者先排尿弃去,准确收集3h尿液于清洁干燥容器内送检,准确测量3h的尿量,取混合尿液10ml置刻度离心管内,1500r/min离心5min,用吸管吸弃上层尿液9ml,留下1ml混匀,吸取尿液1滴,注入血细胞计数板内,红细胞共数10个大格,计数血细胞数,红细胞数男性<3万/h,女性<4万/h。
2.1.2 尿沉渣镜检标准化检测尿液红细胞数 操作步骤取新鲜尿液10ml,离心(1500r/min)5min后,取0.2ml尿沉渣充盈到标准化尿沉渣计数板内,计算出细胞数/μl 。
2.2 尿流式细胞仪检测尿中的红细胞数 其原理以激光散射强度、波幅、荧光强度、波幅等技术识别计数尿中红细胞数。优点是操作简单,快速自动进样,自动分析,便于质量控制,1min内可得出结果。重复性好、误差小、不受人为因素影响等。其缺点是尿液分析仪昂贵,干扰因素多,影响计数结果,因此仪器出现报警时必须作镜检分析,力求达到尿流式细胞仪,干化学与人工镜检互补,以提高尿红细胞的检测质量[1]。
3 鉴别尿液中细胞形态
新鲜尿中红细胞形态对鉴别肾小球源性和非肾小球源性血尿有重要价值。肾小球血尿多为变形细胞血尿,或以其为主的混合性血尿。非肾小球疾病的血尿,则多为均一性血尿[2]。
3.1 普通显微镜法 (1)非染色法,由于缺乏色泽对比和立体感,不易鉴别。(2)染色法(甲基绿色,结晶紫—沙黄染色,瑞氏染色)可增加形态鉴别特征。
3.2 相差显微镜法红细胞立体感强,易于鉴别。
3.3 尿液中有形成分分析如日本的SysmexuF-100,可将尿液中的成分作荧光染色后识别,如肾性血尿,红细胞的散射光分布在图形左侧,而非肾性血尿,红细胞数散射光分布在图象右侧。
综上所述,尿液红细胞检查包括定性方面的检测,定量方面的检测,红细胞的形态、鉴别,各有优点和不足,在实际应用中,应根据病情科学地选择不同的检测方法,提高尿液红细胞检测的质量,为临床提供可靠,准确的实验依据。
【参考文献】
[1] 蔡应木,林静华,焦晓阳.对全自动尿液沉渣分析仪检测结果的质量控制.中华医学检验杂志,2002,20:154.
[2]夏铵安,胡玉祥.卫生专业技术资格考试指导(临床医学检验).济南:山东大学出版社,2004:44., 百拇医药(林桂玲)