冠心康对载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠主动脉粥样斑块及MCP—1、NF—?B表达的影响(2)
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参见附件。
采用免疫组化法。烤片，脱蜡至水；3%H2O2 20 min；PBS 3次；0.05%胰蛋白酶37 ℃，30 min；PBS 3 min×3次；37 ℃封闭1 h；吸去封闭液，加入一抗，4 ℃过夜；37 ℃复温1 h；PBS 3 min×3次；二抗37 ℃，30 min；PBS 3 min×3次；试剂C 37 ℃，10 min；PBS 3 min×3次；DAB显色；充分水洗；HE染色1 min；水洗；分化数秒；氨水反蓝10 min；梯度酒精脱水；二甲苯透明；中性树胶封片；59 ℃烤箱过夜。以PBS代替一抗作为阴性对照。抗原呈颗粒状或呈弥漫性着色，有棕褐色或棕黄色着色的细胞视为阳性细胞。结果分析用Image- ProPlus图像分析系统，各组每张切片随机测定5个视野，测定细胞平均光密度值。
1.9 统计学方法
采用SPSS16.0统计软件进行数据统计分析。数据采用—x±s表示。多组样本间比较采用方差分析检验。检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 一般情况
在饲养过程中，ApoE-/-小鼠因灌胃死亡6只；剔除离群值，最后进入统计的各组小鼠数量均为8只。
2.2 各组小鼠主动脉病理形态观察
HE染色可见：正常组小鼠主动脉壁厚薄均匀，内膜、中膜及外膜未见异常，无动脉粥样硬化病灶(见图1A)。其余5组小鼠主动脉壁存在不同程度的内膜增厚，并有纤维帽的形成，主动脉壁厚度不均一，动脉粥样硬化病灶较明显。其中模型组可见胆固醇结晶的形成(见图1B)。
2.3 冠心康对ApoE-/-小鼠动脉粥样斑块的影响(见表1、表2)
2.4 冠心康对ApoE-/-小鼠动脉壁粥样斑块及周围血管壁单核细胞趋化蛋白l、核因子-κB的影响
与正常组比较 ......
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