大鼠皮肤类过敏试验的方法学研究及适用性考察(2)
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3.2.2 伊文思蓝浓度与皮内注射容积 雌性SD大鼠12只,随机分为2组(0.5%、1.0%伊文思蓝组),称重后用25%乌拉坦(4 mL/kg)麻醉,背部剃毛3 cm×4 cm,在脊柱一侧用胰岛素注射器注射NS 25、50、100 μL共3个点,另一侧注射15 μg/mL C48/80 25、50、100 μL共3个点,立即尾静脉注射0.5%或1.0%伊文思蓝溶液,1 mL/只,后续处理同“3.2.1”项下方法。结果,从蓝斑浸出液OD值与蓝斑直径这2个指标看,25 μL注射容积下模型最为敏感,但因25 μL注射容积较小,操作上易造成误差(针头内相对残留量增大)而降低剂量精确度,而100 μL注射容积下NS对照组蓝斑直径较大(>0.5 cm),故以50 μL作为优选药物注射容积。对应50 μL容积,0.5%伊文思蓝组蓝斑直径与蓝斑OD值敏感系数均高于1.0%伊文思蓝组。故后续试验采用50 μL作为药物注射容积、0.5%伊文思蓝溶液作为尾静脉注射染液浓度。见表4、表5。
3.2.3 注射器类型及注射针头口径 雌性SD大鼠6只,称重后,25%乌拉坦(4 mL/kg)麻醉,背部剃毛3 cm×4 cm,在脊柱一侧用胰岛素注射器(口径:0.33 mm)注射NS及15、30 μg/mL C48/80溶液共3个点,另一侧用普通1 mL无菌塑料注射器(口径:0.45 mm)进行同样注射,立即尾静脉注射0.5%伊文思蓝溶液,1 mL/只,后续处理同“3.2.1”项下方法。结果,采用胰岛素注射器注射给药能减小NS组蓝斑直径及蓝斑浸出液OD值,且胰岛素注射器各C48/80组蓝斑直径及蓝斑浸出液OD值相对于NS组变化均大于对应普通1 mL注射器组,因此,后续试验以胰岛素注射器(针头口径0 ......
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