左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠足细胞nephrin与podocin表达的影响(2)

http://www.100md.com 2014年3月1日 印红爱 吴勇军 喻嵘 成细华 陈聪 罗文娟 何溪沁冰 程莉娟

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    参见附件。

     ①空腹血糖：灌胃前1 d、灌胃4周后，禁食不禁水5 h后，尾静脉采血电化学法血糖仪检测。②尿微量白蛋白(UmAlb)：灌胃前1 d、灌胃4周后，将小鼠放入代谢笼中，禁食不禁水，留取随机尿，采用ELISA法检测，具体操作严格按试剂盒说明进行。③血肌酐(SCr)及血尿素氮(BUN)检测：灌胃4周后，心脏采血，分离血清，采用全自动生化分析仪检测。

    2.3 肾组织透射电镜观察

    取左肾脏皮髓交界处皮质1 mm3大小的肾组织，固定于2.5%戊二醛中，用于透射电镜检测并拍片。

    2.4 RT-PCR法检测小鼠肾皮质nephrin与podocin mRNA表达

    取各组小鼠新鲜肾皮质，用动物组织总RNA提取试剂盒抽提其总RNA，采用紫外分光光度计测定其浓度。取1 ?g总RNA，随后用反转录试剂盒以Oligo(dT)为引物进行逆转录反应。β-actin (500 bp)引物：上游5'-TCAGAAGGACTCCTATGTGG-3'，下游5'-TCTCTT TGATGTCACGCACG-3'。nephrin(211 bp)引物：上游5'-CCCAACACTGGAAGAGGTGT-3' ......

    http://www.100md.com/html/paper/1005-5304/2014/03/16-1.htm

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