响应面法优化复方中药发酵工艺(2)
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参见附件。
2.6.1 菌种 以CZC-4、SZ-2、AQ-1、AQ-2、AQ-3为发酵菌种,接种量3%、发酵温度33 ℃、发酵3 d,以HPLC总峰面积提高率为评价指标,考察不同发酵菌种对复方中药发酵的影响。
2.6.2 接种量 以SZ-2菌种为发酵菌种,发酵温度33 ℃、发酵3 d,接种量分别为1%、2%、3%、4%、5%、6%,以HPLC总峰面积提高率为评价指标,研究接种量对复方中药发酵的影响。
2.6.3 发酵时间 以SZ-2菌种为发酵菌种,发酵温度35 ℃、接种量为5%,发酵时间分别为1、2、3、4、5、6 d,以HPLC总峰面积提高率为评价指标,研究发酵时间对复方中药发酵的影响。
2.6.4 发酵温度 以SZ-2菌种为发酵菌种,接种量为5%,发酵时间3 d,发酵温度分别为30、31、32、33、34、35、36 ℃,以高HPLC总峰面积提高率为评价指标,研究发酵温度对复方中药发酵的影响。
2.7 响应面法优化发酵工艺
通过单因素试验,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,以复方中药制剂中各组分总峰面积的提高率为响应值,设计3因素3水平响应面分析试验,包括12个析因试验和3个中心试验。因素水平编码见表l。数据用Design-Expert 8.0程序分析确定最优发酵工艺参数[6-7]。
3.3.2 响应面分析 利用Design Expert 8.0软件对二次回归模型进行规范分析,以SZ-2菌种为发酵菌种,发酵温度、发酵时间、接种量之间交互作用对总峰面积提高率的影响见图6~图8。
等高线的形状可以反映出因素之间交互效应的强弱,圆形表示两因素不显著,而椭圆则表示较为显著[12]。比较3组等高线图可直观地看出:AC之间的交互作用显著 ......
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