补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的影响(2)
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1.2 药物与试剂
补阳还五汤由黄芪120 g、当归6 g、川芎3 g、地龙3 g、赤芍5 g、红花3 g、桃仁3 g组成，北京大学医学院提供，经水煎、浓缩制成1 g原药材/mL的溶液；2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)：美国(aMResco公司，批号0765)。大鼠MMP-2、MMP-9、VEGF、vWF ELISA试剂盒：美国RB公司，规格96T，购于北京尚柏试剂有限公司(批号分别为63120912、28120811、27121009、52121203)。
1.3 主要仪器
电子分析天平(AE160型，瑞士Mettler公司)，手术显微镜(SXP-1B，上海医用光学仪器厂)，1411型高频小电刀(上海医疗器械技术公司)，低温高速离心机(Sigma公司)，光学显微镜(日本OLYMPUS公司)，切片扫描仪(蔡司光学仪器有限公司)，显微图像分析系统(日本尼康公司)。
2 实验方法
2.1 造模
根据Longa等[2]报道的线栓法建立大鼠永久性脑缺血模型。10%水合氯醛溶液(0.35 mg/kg体质量)腹腔注射麻醉后将大鼠仰位固定，常规碘酒、酒精消毒颈部皮肤。颈部正中作约2.5 cm切口，暴露左侧颈动脉三角，在手术显微镜下逐层分离组织，剥离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)。电刀凝闭ECA的分支甲状腺动脉、ECA与ICA之间的枕动脉，结扎游离ECA主干，分离ICA主干至翼腭动脉(PPA)，用无损动脉夹分别夹闭CCA、ICA和PPA，用虹膜剪在ECA残端剪一楔形小口，由此插入钓鱼线(直径0.25 mm，头端呈直径约0.3 mm的圆球形) ......
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