LC—MS/MS同时定量测定大鼠血浆中复方血栓通胶囊的8种入血成分(3)
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参见附件。
2.5.4 稳定性 按“2.3”项下方法制备高、中、低浓度的5组血浆样品，每组5个，分别在室温下放置0、9、18 h，-20 ℃下放置48 h的血浆冻融1次，-20 ℃下放置48 h的残渣冻融1次，进行分析测定，得RSD。
3 结果
3.1 专属性与基质效应
8种成分的质谱色谱图专属性良好，无杂质响应干扰，见图2。内标盐酸巴马汀与8种有效成分基质效应的响应值均呈现一致性，盐酸巴马汀可作为内标。
4 讨论
4.1 前处理方法的确定
在样品前处理过程中，皂苷类待测成分(如三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1)的极性较大，而二萜醌类成分(即丹参酮Ⅰ)极性较小。为更快捷地处理样品，试验中根据化合物性质及检测条件拟定了多个方案，分别采用去蛋白法、萃取法对样品进行处理，如不同量的甲醇、乙腈分别与正丁醇或氯仿或乙酸乙酯按1∶1、1∶2、1∶3、2∶3比例混合、甲醇和乙腈与0.3%盐酸按5∶1和10∶1比例混合，不同混合溶剂对生物样品进行蛋白质沉淀和成分萃取。甲醇沉淀和乙腈沉淀蛋白后所得的皂苷类待测成分绝对回收率均符合生物样品定量法要求，而二萜醌类成分所得绝对回收率则相对较低。采用甲醇-正丁醇/氯仿/乙酸乙酯或乙腈-正丁醇/氯仿/乙酸乙酯混合溶剂萃取时，结果显示，丹参酮Ⅰ绝对回收率可达到要求，但皂苷类成分尤其是三七皂苷类成分的绝对回收率结果较差，均在20%～40%之间。而采用加入盐酸萃取的方法所得的三七皂苷类成分回收率最低，丹参酮Ⅰ回收率无明显改善。因此，综合各有效成分的绝对回收率，采用3倍量的甲醇沉淀蛋白后8种有效成分的提取率最高。
此外 ......
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