RP-HPLC同时测定四逆散中4种有效成分含量(2)
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柚皮苷对照品(批号110722-200607)、芍药苷对照品(批号110736-200611)、橙皮苷对照品(批号110721-200211),中国药品生物制品检定所；甘草酸单铵盐(HPLC>98%,批号100-200611),成都思科华生物技术有限公司；乙腈(HPLC级,批号81120)、甲醇(HPLC级,批号53783),美国迪马(DIKMA)试剂公司；水,Millipore water purification systems制备；磷酸(优级纯,批号20101028),北京益利精细化学品有限公司。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：A为乙腈,B为0.05%磷酸水,线性梯度洗脱,洗脱程序见表1；检测波长：240 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。色谱图见图1。
表1梯度洗脱程序
时间(min)流动相A(%)流动相B(%)
0～ 812～22 5～14
8～2586～7514～25
25～4575～4525～55
45～6545～2055～80
2.2四逆散样品的制备
按处方比例精密称取药材适量,加入10倍体积水,煎煮2次,每次1 h,过滤,合并滤液,减压浓缩至稠膏状,并于70 ℃水浴浓缩至0.8 kg原药材/L。
A
B
C
D
E
注：A.混合对照品；B.供试品；C.白芍阴性对照；D.甘草阴性对照；
E ......
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